用VIGS技术研究若干豌豆花同源异型基因的功能

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利用基于豌豆早褐病毒(pea early browning virus,PEBV)的VIGS体系对豌豆的花同源异型转变的ABCE类代表基因PEAM4、PsPI、PsAG和PsSEP1/2的5’端对应编码MADS区的序列进行VIGS载体构建并进行病毒接种,对接种的植株进行表型观察并做遗传统计分析,结果表明,选择高度保守的区段进行VIGS可以将一类保守性高的同源基因沉默掉。另外对豌豆中APETALA1/FRUITFULL-Like同源基因PEAM4保守和特异区段及PsFUL保守区的VIGS构建并进行病毒接种。结果表明PsFUL保守区的VIGS在花型上变化不明显。同时,针对PEAM4,我们分别对其保守区段和特异区段做了VIGS构建,结果表明这两个构建都很好地模拟了其突变体pim的表型,它有两个突变形式,分别为pim-1和pim-2,具体表现为延迟了花分生组织的分化并对花的形态有很大影响,这类似于拟南芥APETALA1(AP1)突变体apl的表型。在野生型拟南芥中AP1通过抑制一组开花时间基因AGL24,SVP,SOC1来维持花分生组织的属性,防止花的逆转。在AP1缺失的情况下,这些基因异位表达。利用系统进化树分析,找了了在豌豆中SVP,SOC1的同源基因PsSOC1a和PSSVP,并利用定量PCR和原位杂交检测了它们在PEAM4沉默株里的表达模式,证明了PEAM4的VIGS丰富多样的表型,是由PsSOC1A和PsSVP异位表达引起的。
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