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目的：单纯疱疹病毒胸苷激酶基因治疗是一种应用最广泛的基因治疗策略,本研究探讨由人端粒酶逆转录酶启动子驱动单纯疱疹病毒胸腺激酶基因的重组腺病毒联合更昔洛韦对小鼠肝癌腹腔种植腹水生成的影响。方法：1.将hTERT启动子驱动单纯疱疹病毒胸腺激酶基因的重组腺病毒进行扩增、纯化及滴度测定；2.将腹腔内接种H22细胞的小鼠随机分为Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV组、Ad-hTERTp-HSV-TK组、GCV组和空白对照组,48h后给与相应的治疗,并观察各组小鼠体重、腹围、腹水量、生存时间,以及对体内脏器的影响；3.流式细胞仪测定腹水肿瘤细胞凋亡百分率；4.透射电镜观察腹水肿瘤细胞的形态学变化。结果：1.将病毒液扩增、纯化后,用50%组织培养感染剂量法(TCID50)测定病毒滴度为1.5×1010pfu／ml；2.经过Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV治疗的小鼠,显示出明显的腹水抑制作用,体重和腹围增长缓慢,其腹水量显著低于各对照组(P<0.01),生存时间延长(P<0.01),并且对体内脏器无明显毒副作用。3. Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV组腹水肿瘤细胞凋亡率为(27.12±2.12)%,明显高于其他各对照组(P<0.01)4.电镜下观察Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV组的腹水肿瘤细胞呈凋亡改变。结论：Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV系统可通过诱导肝癌细胞凋亡而抑制小鼠腹水生成,并延长生存期,是一种安全可行的治疗方法,对其临床应用具有理论意义。