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背景与目的乳腺癌已成为中国女性最常见的恶性肿瘤,严重威胁中国女性的生命与健康。早期发现、早期诊断、早期治疗是降低肿瘤死亡率的最重要手段。乳腺癌是遗传背景最强的肿瘤之一,通过检测易感基因突变,筛查高危人群,能够较其他肿瘤更易于早期防控。BRCA1和BRCA2是最主要的乳腺癌易感基因,在发达国家已开展这两个基因的商业化检测,并具有专业的遗传咨询机构。但是在中国,特别是大陆地区,从21世纪初才有相关报道,多为单中心研究,存在病例数少,缺乏整体代表性的缺点,导致中国人群BRCA1/BRCA2的突变谱存在明显偏小,与占全世界1/5人口的国情不相符。本研究旨在研究中国乳腺癌高危人群BRCA1/BRCA2突变位点,对比其他种族,进行全面分析总结,以及与临床病理学特征的关系,为制定适合中国人群的BRCA1/BRCA2遗传检测策略奠定基础。方法与对象本课题主要分为两部分研究。第一部分：通过PCR-测序方法,检测62例中国浙江地区家族性乳腺癌患者的BRCA1胚系突变,并分析其临床病理学特征。家族性乳腺癌患者入选标准：(1)家系中至少有2个一级或者二级亲属患原发性乳腺癌,不考虑发病年龄；2)乳腺癌患者,其一级或者二级亲属患原发性卵巢癌。所有受试者均获得知情同意。由DNA抽提试剂盒提取所有患者的外周血DNA。第二部分：在生物信息学数据库中,通过检索关键词,收集所有发表于2012年9月之前的BRCA1/BRCA2在中国乳腺癌高危人群中的突变研究文献,汇总所有点突变位点以及大基因组重排,进行分析总结。结果第一部分研究：(1)在62例中国浙江地区家族性乳腺癌患者中,总共有7例发生BRCA1胚系致病性突变,突变率为11.3%(7/62)。其中2个为新发现的突变位点(3414delC和5208C>T),2个突变位点重复出现(5273G＞A和5589de18)。另外3273C＞T和4184del4在中国人群中首次被报道。(2) BRCA1突变相关乳腺癌主要表现为发病年龄提前,ER/PR阴性率和三阴性率高(ER、PR和HER2均为阴性),并且肿瘤病理分级高的特点。第二部分研究：(1)共检索到有效文献21篇,其中涉及BRCA1点突变的文献16篇,BRCA2点突变的文献11篇,BRCA1/BRCA2大基因组重排的文献5篇。(2)在点突变的检测方法中,早期的研究以PCR-单链构象多态性(SSCP)-DNA测序方法为主,作为高敏感性的PCR-变性高效液相色谱分析(DHPLC)-DNA测序的方法也常被采用,最新的文献主要采用准确性更高的PCR-DNA测序方法。(3)BRCA1点突变的乳腺癌患者共103例,在中国家族性乳腺癌中的突变率为5.0%(52/1045),年轻乳腺癌中的突变率为3.7%(20/546)。(4) BRCA2点突变的乳腺癌患者共91例,在中国家族性乳腺癌中的突变率为6.7%(51/757),年轻乳腺癌中的突变率为3.2%(10/313)。(5)点突变大部分位于基因的第11号外显子,其中位于第11号外显子的点突变占BRCA1所有点突变的56.3%(58/103),占BRCA2所有点突变的53.8%(49/91)。(6)在所有点突变中,移码突变是最常见的突变类型,其在BRCA1所有点突变中占63.1%(65/103),在BRCA2所有点突变中占74.7%(68/91)。(7)一些点突变位点在中国乳腺癌高危人群中被反复报道.BRCA1和BRCA2中最常见的突变位点分别是5899de18和3109C>T,分别占各自基因所有点突变的10.7%(11/103)和4.4%(4/91)。(8)在BRCA1致病性点突变中,有56.3%的突变在BIC数据库中未被报道；在BRCA2致病性点突变中,有47.9%的突变在BIC数据库中未被报道。(9)在5篇BRCA1/BRCA2大基因重排研究文献中,采用的方法都为多重连接依赖探针扩增技术(MLPA).(10)总共有7例发生大基因组重排,其中BRCA1和BRCA2分别为5例和2例,占BRCA1/BRCA2所有突变的3.5%(7/201)。结论根据本研究的结果,认为：(1)在中国乳腺癌高危人群中,虽然BRCA1/BRCA2的总突变率较高加索人群低,但仍需要进行这两个基因的胚系突变检测,有助于高危人群的早期筛查；(2)重复出现的突变位点,如BRCA15899de18和BRCA23109C>T等,在突变筛查时应首先被检测,突变阴性者再检测第11号外显子,通过该流程可能会降低检测成本、提高检测效率；(3)中国乳腺癌高危人群的BRCA1/BRCA2突变谱具有种族特异性,有50%左右的突变位点在其他种族中未被报道；(4)BRCA1/BRCA2大基因组重排在中国乳腺癌高危人群中同样存在,在遗传筛查应被常规推荐；(5)中国人群的BRCA1突变乳腺癌在临床病理学特征上与高加索人群存在相似性,对于制定筛查基因突变人群的诊断模型具有一定的参考价值。本研究对于制定中国人群甚至亚洲相似人群的乳腺癌高危筛查策略具有重要意义。