橙皮素对人类Kv1.5通道、Nav1.5通道及人心房肌细胞Ikur和INa的影响

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第一部分橙皮素对表达于HEK293细胞上的Kv1.5钾离子通道的作用目的:本部分实验旨在探讨橙皮素对表达在HEK293细胞系上的人类心脏Kv1.5钾离子通道的作用。方法:本部分实验采用全细胞膜片钳技术,探讨橙皮素对表达于HEK293细胞上的人类心脏Kv1.5钾离子通道电流的影响。结果:橙皮素呈浓度依赖性和可逆性抑制人Kv1.5通道电流,其IC50的浓度为23.15μmol/L,Hill系数为0.89。300μmol/L橙皮素对Kv1.5通道电流的抑制率高达71.36%。橙皮素可使Kv1.5通道的稳态激活曲线显著右移,而使其稳态失活曲线明显左移。橙皮素加快通道的失活同时可以明显减缓Kv1.5通道电流从失活状态恢复的过程。橙皮素对Kv1.5通道电流的阻断作用呈频率依赖性的。然而,电极内液里含有30μmol/L橙皮素对Kv1.5通道电流没有影响,而含有30μmol/L橙皮素的细胞外液能够显著和可逆的抑制Kv1.5通道电流。结论:橙皮素是一种有效的Kv1.5通道开放性阻滞剂,该作用可能是橙皮素从外侧结合于Kv1.5通道开放状态和失活状态实现的。第二部分橙皮素对表达于HEK293细胞上的Nav1.5钠离子通道的作用目的:本研究旨在探讨橙皮素对稳定表达在HEK293细胞系上的人心脏Nav1.5通道的抑制作用。方法:本部分实验采用全细胞膜片钳技术,探讨橙皮素对表达于HEK293细胞上的人类心脏Nav1.5钾离子通道电流的影响。结果:橙皮素呈浓度和电压依赖性且可逆性抑制Nav1.5通道电流,其IC50的浓度是62.99μmol/L。橙皮素能显著的使Nav1.5通道电压依赖性的激活曲线和失活曲线左移,同时显著的减缓Nav1.5电流的失活和其从失活状态恢复的过程。而且橙皮素对Nav1.5通道的抑制作用具有频率依赖性。结论:橙皮素是一种有效的Nav1.5通道开放性阻断剂,其既能影响Nav1.5通道开放状态,又能影响其失活状态。第三部分橙皮素对人心房肌细胞的Ikur和INa的影响目的:本部分实验旨在探讨橙皮素对人心房肌细胞上的超快速延迟整流钾电流(Ikur)和电压依赖性钠电流(INa)的影响。方法:本部分运用全细胞膜片钳技术探讨橙皮素对人心房肌细胞上的超快速延迟整流钾电流(Ikur)和电压依赖性钠电流(INa)的影响。结果:橙皮素能够有效的和可逆的抑制人心房肌细胞上表达的超快速延迟整流钾电流(Ikur)和电压依赖性钠电流(INa),这些结果与第一部分中橙皮素对表达在HEK293细胞系上的Kv1.5通道的作用和第二部分橙皮素对表达在HEK293细胞系上的Nav1.5通道的作用是一致的。结论:橙皮素是一个有效的心房肌细胞Ikur和INa的抑制剂。结论橙皮素是一个有效的人心房肌细胞Ikur和INa的抑制剂。橙皮素对人心房肌细胞Ikur的抑制作用是通过细胞外侧结合于Kv1.5通道的开放和失活状态起作用的。与之类似,橙皮素对Nav1.5通道的抑制作用是通过结合于Nav1.5通道的开放和失活状态起作用的。然而,橙皮素对Ikur和INa的抑制作用是否能在房颤的治疗方面得到应用还需进一步的研究。
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