致病疫霉有性生殖不同阶段的磷酸化蛋白质组学分析

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pangdunpiwen
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致病疫霉(Phytophthora infestans)属于卵菌纲,是一种半生物营养病原体,可导致马铃薯和许多相关植物的晚疫病。对于马铃薯,该病每年造成的损失和管理费用估计超过60亿美元,是全球粮食安全的重大威胁。有性生殖是疫霉生命周期中的一个重要事件,但目前对有性生殖的机理研究仍然不足。本研究以致病疫霉菌株P7723和HQK8-3为材料。检测了黑麦培养基(RA)、胡萝卜培养基(CA)、放置玻璃纸的黑麦培养基(CP)、放置聚碳酸酯膜的黑麦培养基对致病疫霉生长和生殖的影响,筛选出放置WATMAN聚碳酸酯膜的黑麦培养基是最适合收集有性生殖菌丝体的培养基。将菌株P7723和HQK8-3进行对峙培养,收集有性生殖阶段中三个时间点的菌丝体,分别为交接0天(PP0_P组、PP0_H组)、3天(PP3组)和9天(PP9组)的菌丝体;使用非标记定量技术(Label Free)研究致病疫霉有性生殖在不同时间点的差异磷酸化蛋白表达谱,并对差异蛋白表达谱进行了系统的生物信息学分析,筛选出一批潜在地可能与致病疫霉有性生殖密切相关的蛋白。磷酸化蛋白质组学分析共检测到磷酸化肽段3938个,鉴定到的蛋白质2028个。PP3组和PP0_P组(对照组)相比,有444个差异蛋白质,经过level2水平的GO功能注释及KEGG通路分析,筛选到6个具有显著差异的磷酸化蛋白,包括PITG_00334、PITG_11466、PITG_13426、PITG_13666、PITG_19590、PITG_21117;PP3组和PP0_H组(对照组)相比,筛选到1个具有显著差异的磷酸化蛋白,为PITG_10663;PP9组和PP3组(对照组)相比,筛选到6个具有显著差异的磷酸化蛋白,包括PITG_00397、PITG_06171、PITG_18434、PITG_01036、PITG_03936、PITG_16833。这些蛋白极有可能参与致病疫霉有性生殖过程,其功能需要在今后的工作中进一步验证。本研究通过磷酸化蛋白质组学的分析筛选到与致病疫霉有性生殖过程相关的磷酸化蛋白,促进了对致病疫霉有性生殖中信号通路的理解,对今后在此基础上更加有效的防治疫霉菌病害具有重要意义。
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