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目的:神经病理性疼痛(Neuropathic pain,NPP)是目前临床上最难治的慢性疼痛,其致病原因复杂、机制不清,缺乏有效的治疗手段,给社会及患者带来沉重的负担。而带状疱疹后遗神经痛(Postherpetic neuralgia,PHN)是临床上最常见的NPP,疼痛程度剧烈,迁延不愈。因此,本研究将采用蛋白芯片技术筛选PHN患者的差异表达蛋白,并且对差异表达蛋白进行扩大临床样本验证;建立NPP的选择性神经损伤(Spared nerve injury,SNI)动物模型,初步探索差异表达蛋白在NPP中的可能致病机制,从而为深入挖掘NPP的发病机制提供潜在分子基础。方法:1:选择2019年6月～2019年10月于西南医科大学附属中医医院就诊的PHN患者43例,作为病例组(PHN组);纳入性别及年龄相仿的正常人43位,作为正常对照组(CON组)。记录两组研究对象的性别、年龄、体重指数(Body mass index,BMI)等一般情况;视觉模拟评分法(Visual analogue scale,VAS)评价PHN患者的疼痛程度。抽取两组研究对象的静脉血,获取血清,编号后-80℃冰箱保存备用。分别从PHN组及CON组中随机选取3例血清样品,采用TMT蛋白芯片技术检测PHN患者相比于正常人的差异表达蛋白。2:基于蛋白芯片筛选的结果,采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)对两组中各40例研究对象的血清中目标差异表达蛋白二肽基肽酶(Dipeptidyl peptidase 4,DPP4)的表达情况进行验证。3:选取90只成年Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠(200-250g,6-8周龄)作为动物实验对象,随机分为3组,即:假手术组(S组),模型组(M组),DPP4抑制剂组(D组),n=30。S组仅暴露神经,不损伤;对M组构建SNI模型;D组大鼠在构建SNI模型后,每日行DPP4抑制剂(维格列汀10mg/ml)10ul鞘内注射;M组和S组则鞘内注射10ul生理盐水作为干预对照。于SNI术前1天(T0)、术后3天(T1)、术后7天(T2)、术后14天(T3)对3组大鼠进行行为学检测,检测内容包括:热缩足反射潜伏期(Thermal withdrawl threshold,TWL)和机械缩足反射阈值(Mechanical withdrawl threshold,MWT)。T1时间点行为学检测结束后,对三组大鼠进行腰4-5(L4-5)脊髓节段及患侧腰5(L5)背根神经节(Dorsal root ganglion,DRG);ELISA检测L4-5脊髓节段及L5 DRG中DPP4的表达量及L4-5脊髓节段中炎症因子IFN-γ、TNF-α的释放情况;免疫荧光及Western blot检测L4-5脊髓节段中小胶质细胞标记物Iba-1及L5 DRG中伤害性感觉神经元标记物降钙素基因相关肽(Calcitonin genalcitonin gene-related peptide,CGRP)的表达情况。结果:1:两组研究对象的年龄、性别、BMI比较无统计学差异(P>0.05);PHN患者的VAS评分为6.0±0.8,CON组的研究对象则无任何疼痛。经蛋白芯片筛选后,发现PHN患者有127个血清差异表达蛋白,其中包括79种蛋白表达上调和48种蛋白表达下调。2:在上调的差异表达蛋白中,选择DPP4作为目标蛋白,发现PHN组患者血清中DPP4浓度为4093.02±858.30 pg/ml,CON组患者血清中 DPP4 浓度为 1978.10±579.01 pg/ml,相比于 CON 组,PHN 组血清DPP4表达显著上调(P<0.05)。3:SNI大鼠从T1开始出现NPP的症状,即:M组和D组大鼠的MWT及TWL在T1～3时均相比于S组显著降低(P<0.05);然而鞘内注射DPP4抑制剂改善SNI大鼠的疼痛程度,相比于M组,D组大鼠的MWT及TWL在T1～3时均显著上升(P<0.05)。此外,M组和D组大鼠L4-5脊髓节段及L5 DRG中DPP4的表达量在T1～3时均相比于S组显著上升(P<0.05);但相比于M组,D组L4-5脊髓节段及L5 DRG中DPP4的表达量在T1～3时显著下降(P<0.05)。M组和D组大鼠L4-5中小胶质细胞在T1～3时明显活化;但相比于M组,D组活化程度明显减弱,T3时D组大鼠L4-5中Iba-1的表达量相比于M组明显减少(P<0.05)。不仅如此,SNI术后大鼠L4-5中IFN-γ、TNF-α的释放增加,即:M组和D组大鼠L4-5中IFN-γ、TNF-α在T1～3时相比于S组显著上调(P<0.05),但相比于M组,D组的上调程度受到明显抑制(P<0.05)。M组与D组L5 DRG中CGRP的表达情况在T1～3时相比于S组均明显增强,但相比于M组,D组中CGRP表达受到明显抑制,T3时D组大鼠L5 DRG中CGRP的表达量相比于M组明显减少(P<0.05)。结论:1:NPP患者外周血及NPP动物模型的L5 DRG、L4-5脊髓中DPP4表达增加;2:DPP4可能通过促进DRG中伤害性神经元兴奋性增强以及脊髓背角中小胶质细胞增殖活化而介导NPP的外周敏化及中枢敏化。