虾夷扇贝闭壳肌中的章鱼碱脱氢酶及其捕后变化

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:xiangxuehai0726
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为探索采捕后活品贝类的品质变化规律,以虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)为研究对象,从无脊椎动物特有的糖酵解酶章鱼碱脱氢酶(ODH)出发,对活品虾夷扇贝流通过程中的代谢变化进行初步探索。本研究以闭壳肌为重点,研究ODH的基本酶学性质和在干露条件下的代谢应答。在此基础之上,对模拟活品贮藏条件下不同组织(横纹肌、平滑肌、外套膜、内脏、性腺、鳃)中的ODH活性变化也做了初步研究。(一)扇贝闭壳肌OpDHs分布及ODH性质:从新鲜原料的闭壳肌中提取ODH进行研究。ODH是虾夷扇贝闭壳肌中最重要丙酮酸还原酶,其活性远高于其他OpDHs及LDH;ODH最适温度为40℃左右,最适pH为6.5左右;Ca2+、Mg2+、Mn2+、Cu2+、Fe3+对ODH活性均有抑制作用;丙氨酸对ODH活性没有影响,醋酸盐和丙酸盐对ODH的抑制作用较弱,ATP对ODH的抑制作用较强,琥珀酸对ODH的抑制作用最强;对ODH进行了初步分离纯化,得到了分子量为44KDa左右的条带,并初步推测为ODH。(二)捕后干露处置下的ODH变化规律:分析干露条件下活品虾夷扇贝闭壳肌中的ODH变化及其他能量代谢产物的变化。闭壳肌中pH、ATP及其关联物、磷酸精氨酸在干露期间都发生了显著下降,表明正常代谢收到干扰;精氨酸和天冬氨酸显著下调,琥珀酸积累的同时苹果酸和延胡索酸下调,这些现象都表明无氧代谢开始发挥作用。之后对无氧代谢中发挥重要作用的章鱼碱脱氢酶进行研究,发现其酶活对环境胁迫有一定应答作用,且环境胁迫越剧烈,酶活上升越明显。总之,虾夷扇贝闭壳肌中的章鱼碱脱氢酶活性存在胁迫应答效应,具有作为活品品质评价生物指标的潜力。(三)活品贮藏条件下的ODH变化规律:研究模拟活品贮藏条件下虾夷扇贝各组织(横纹肌、平滑肌、外套膜、内脏、性腺、鳃)中ODH的活性变化。模拟虾夷扇贝活品贮藏条件,设置了湿藏充氧、湿藏不充氧、干藏充氧、干藏不充氧4种贮藏模式,研究各组织中ODH活性变化。肌肉组织中ODH活性较高,湿藏组ODH活性在经历了贮藏初期波动之后,其活性呈现下降趋势,而干藏组ODH活性在贮藏后期仍有上升趋势,充氧与否没有明显区别。而在其他组织中,性腺中ODH应答与肌肉组织相似,鳃、外套膜、内脏中的ODH活性极低,且无明显规律。
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