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本论文以海洋高等沉水植物大叶藻为研究对象,对它的显微及超微结构和组织培养进行了初步的研究,得到如下结果。
1.大叶藻的形态学观察结果:
(1)石蜡切片解剖学观察显示,大叶藻叶仅有一层表皮细胞,细胞较小而排列紧密,细胞内分布大量的叶绿体。叶肉细胞很大,为大型的薄壁组织,不含叶绿体。叶片内散布着排列十分发达的通气组织。通气组织间分布有叶片维管束。叶表皮细胞与海水接触的细胞壁可见有明显的增厚。
(2)大叶藻地下茎的石蜡切片观察可见,茎表皮同样是由一层小而排列紧密的细胞构成的,与外界接触的细胞壁有明显的增厚。茎的中心是中央维管束,中央维管束和表皮之间是由薄壁细胞组成的薄壁组织,其间规则的分布着通气组织,但不如叶片的发达。
(3)从大叶藻根的石蜡切片可以看出,根表皮细胞一层且小,排列紧密,海水接触部分的细胞壁明显增厚。根的中心是维管束。表皮和维管束之间有一层薄壁细胞和发达的通气组织。
(4)大叶藻花的解剖结构观察表明,大叶藻花小,单性,无花被,雌雄花同生于一扁平的肉穗花序上。花的结构简单,雄花仅1枚雄蕊,雄蕊1花药,花药1室、无柄、纵裂,长约5.5-6.5mm,宽约1mm;雌花仅一心皮,有胚珠1颗,柱头2个,子房长约2-2.5mm,柱头长约1-1.5mm。
(5)从大叶藻雄蕊和心皮的扫描电镜图片中可以观察到,心皮有两个分叉的柱头,从柱头到胚珠处细胞的细胞壁表面有大量的丝状突起。在柱头的纵切方向,细丝从前一个细胞发出连接到后一个细胞壁上。从柱头与子房的连接处到近子房底部的区域,心皮表面细胞壁上的细丝与周围的细胞都相连。远离柱头端的子房细胞表面没有细丝的分布。雄蕊的细胞表面也没有细丝。大叶藻的花粉为丝状,大小约为1200-29001μm×3.5-9.5μm,花粉丝表面有不规则卷曲。
2.大叶藻组织培养实验结果:
(1)大叶藻消毒的最佳条件为1%的次氯酸钠处理10分钟。
(2)大叶藻愈伤组织诱导的基本培养基为MS培养基,添加2,4-D浓度为2mg/L,6-BA浓度为1mg/L时愈伤诱导率最高。
(3)根、茎、叶三种外植体中,茎诱导愈伤组织率最高。
(4)0.5%的活性炭和降低光照强度对培养中出现的褐化现象有一定的抑制作用。