联合两种分子诊断技术在肺结核诊断及耐药检测中的应用

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目的:比较分析常规方法与恒温扩增技术(SAT)检测结核分枝杆菌,膜反向斑点杂交技术(RDB)检测结核耐药性的技术特点,评估SAT联合RDB技术在快速诊断肺结核及耐药检测的应用价值。方法:对108例疑似肺结核患者和15例非肺结核患者痰样本分别进行抗酸染色镜检、Bactec MGIT 960快速液体培养及药敏检测、GeneXpert MTB和SAT检测,对其中53例确诊为肺结核患者的痰样本进行RDB、DNA测序及GeneXpert MTB/RIF耐药分析,统计分析比较其方法学特点。结果:Bactec MGIT 960快速液体培养、SAT、GeneXpert MTB法的阳性率分别为50.0%(54/108)、62.0%(67/108)和64.8%(70/108);以临床诊断为标准,三者的灵敏度分别为47.1%(48/102)、65.7%(67/102)和68.6%(70/102),特异性分别为71.4%(15/21)、100%(21/21)和100%(21/21)。RDB技术与Bactec MGIT 960药敏结果相比,灵敏度、特异性和符合率分别为77.8%(7/9)、95.5%(42/44)和92.4%(49/53);与DNA测序结果相比,灵敏度、特异性和符合率分别为87.5%(7/8)、100%(45/45)和98.1%(52/53)。5例Bactec MGIT960药敏检测结果为利福平耐药株,在GeneXpert MTB/RIF和RDB检测结果中均检出rpoB基因位点突变。结论:SAT技术不仅简便快速,而且可以提高临床肺结核诊断的阳性率及灵敏度,而RDB技术可以快速筛查结核分枝杆菌耐药性,二者联合应用对肺结核快速诊断及耐药检测有重要价值。
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