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牡丹,被尊为“国色天香”“花中之王”。中国牡丹园艺品种根据栽培地区和野生原种的不同,分为4个牡丹品种群,江南牡丹品种群是由杨山牡丹与古代时中原牡丹南移后适应当地风土条件而形成的品种,相互杂交而形成的后代群体。对江南牡丹进行细胞学、胚培养及诱变效应研究,对于保存、开发、利用江南牡丹具有重要意义。
1)对江南牡丹品种‘凤丹’的核型和花粉母细胞减数分裂行为进行研究,结果表明:‘凤丹’为二倍体,染色体数2n=10,核型公式:2n=2x=10=6m+2sm+2st,属于2A型,没有观察到随体,推测‘凤丹’和杨山牡丹不是异名同物,主要表现在随体有无。与杨山牡丹的核型进行比较发现:从杨山牡丹演化到‘风丹’系列是由纯合向不同等级的杂合;‘凤丹’减数分裂过程中具有不同步性,在后期Ⅰ、末期Ⅰ观察到染色体桥,在后期Ⅱ、末期Ⅱ分别观察到“对角线”桥、不均等分裂、双桥等现象;上海地区‘凤丹’花粉母细胞减数分裂的观察取材最佳时间为2月底~3月初。
2)用C<,0><60>。辐射‘凤丹’萌发种子、一年生‘凤丹’苗、二年生‘凤丹’苗、4年生‘凤丹’植株,通过对辐射剂量与发芽率的相关性分析得出:‘风丹’种子的半致死辐射剂量为20~30Gy(剂量率在1~2 Gy/min);辐射剂量与存活率的关系得出:一年生‘凤丹’苗的适宜辐射剂量为20~30Gy,二年生‘凤丹’苗适宜辐射剂量为30~40Gy,四年生‘凤丹’植株适宜辐射剂量为40~50Gy。
3)用不同浓度梯度的秋水仙素、十二烷基硫酸钠(SDS)、平阳霉素(PYM)分别处理‘凤丹’的种子(50℃温水浸泡24h、根长0.5cm、根长1-2cm),通过对其发芽率、物候期、生长量的观察得出:在处理初期,秋水仙素促使‘凤丹’根尖膨大,导致染色体加倍,而SDS对其生长没有影响,PYM使‘凤丹’根尖停止生长;秋水仙素、SDS对‘凤丹’的发芽率没有影响,PYM对‘凤丹’的致死率较高。同时,三种处理的50℃温水浸泡24h‘风丹’种子无一发芽。
4)选用‘凤丹’种胚作为组培材料,用MS添加各种激素作为培养基,对江南牡丹进行胚培养的初步建立。实验结果显示:在初代培养中,培养基MS+BA0.1mg·L<-1>+IAA1.0mg·L<-1>+GA<,3>0.4mg·L<-1>为最适宜的初代培养基,添加的GA<,3>能够有效的打破其体眠;在增殖培养中,培养基MS+BA2.0mg·L<-1>+NAA 0.5mg·L<-1>为‘风丹’增殖的最佳培养基,能够诱导芽的增殖;在生根诱导中,选用培养基使生根失败。采用种胚培养可以打破上胚轴的休眠,大大缩短初代培养周期。