孕晚期SD大鼠母体接受丙泊酚全身麻醉对子代学习记忆功能及海马区BDNF表达的影响

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目的:探讨孕晚期SD大鼠母体接受丙泊酚全身麻醉对子代学习记忆功能及海马区BDNF表达的影响,从而探讨其对子代学习记忆的影响机制。方法:清洁级雌性SD大鼠30只,雄性SD大鼠15只,月龄7周,体重180-210g,采用随机数表法,将其随机分为3组,丙泊酚4h组(Pro4组)、丙泊酚8h组(Pro8组)和对照组(C组),每组各10只。于孕18天,Pro组孕鼠丙泊酚20 mg/kg尾静脉注射,翻正反射消失后,以丙泊酚20 mg·kg-1·h-1麻醉维持,时间分别为4h和8 h;对照组孕鼠给予等容量生理盐水。各组子鼠出生后30 d分成Trk B激动剂(7,8-DHF)亚组(Pro4D、Pro8D、CD亚组)和Trk B激动剂溶媒亚组(Pro4N、Pro8N、CN亚组),激动剂亚组子鼠进行Morris水迷宫实验前2小时腹腔注射7,8-DHF(5mg/kg),溶媒亚组子鼠腹腔注射等体积溶媒。于Morris水迷宫实验结束后第2天,取子鼠海马组织,采用Real Time PCR法测定海马BDNF m RNA和Trk B m RNA的表达水平,用免疫组化法测定BDNF和Trk B蛋白表达水平。结果:(1)Morris水迷宫测试结果:丙泊酚麻醉各溶媒亚组(Pro4N、Pro8N)和Trk B激动剂亚组(Pro4D、Pro8D)子鼠逃避潜伏期分别较对照组溶媒亚组(CN)及其相应的Trk B激动剂亚组(CD)子鼠明显延长(P<0.05)。丙泊酚麻醉溶媒亚组(Pro8N)和Trk B激动剂亚组(Pro4D、Pro8D)子鼠的第二象限活动时间及穿越平台次数均分别较对照组溶媒亚组(CN)和对照组Trk B激动剂亚组(CD)子鼠减少(P<0.05)。对照组Trk B激动剂亚组(CD)子鼠的逃避潜伏期较其溶媒亚组(CN)子鼠缩短(P<0.05),而CD亚组子鼠的第二象限活动时间则较对照组溶媒亚组(CN)增加(P<0.05)。丙泊酚麻醉各Trk B激动剂亚组(Pro4D、Pro8D)子鼠的逃避潜伏期分别较其相应的溶媒亚组(Pro4N、Pro8N)子鼠缩短(P<0.05),而其在第二象限活动时间和穿越平台次数则均分别较其相应的溶媒亚组子鼠增加(P<0.05)。Pro8N亚组子鼠逃避潜伏期明显较Pro4N亚组子鼠长(P<0.05),而其在第二象限活动时间和穿越平台次数则较Pro4N亚组子鼠减少(P<0.05)。Pro8D亚组子鼠逃避潜伏期明显较Pro4D亚组子鼠长、而其在第二象限活动时间和穿越平台次数则均较Pro4D亚组子鼠减少(P<0.05)。(2)RT-PCR检测结果:与对照组溶媒亚组(CN)比较,丙泊酚麻醉各溶媒亚组(Pro4N、Pro8N)组子鼠海马区BDNF m RNA和Trk B m RNA表达水平减少(P<0.05)。与之相似,与对照组Trk B激动剂亚组(CD)比较,丙泊酚麻醉各Trk B激动剂亚组(Pro4D、Pro8D)组子鼠海马区BDNF m RNA和Trk B m RNA表达水平减少(P<0.05)。与相应的溶媒亚组(CN、Pro4N、Pro8N)相比,Trk B激动剂各亚组(CD、Pro4D、Pro8D)子鼠海马区BDNF m RNA和Trk B m RNA表达水平增加(P<0.05)。(3)免疫组化检测结果:与对照组溶媒亚组(CN)比较,丙泊酚麻醉各溶媒亚组(Pro4N、Pro8N)组子鼠海马区BDNF和Trk B阳性细胞较少、染色较浅。与之相似,与对照组Trk B激动剂亚组(CD)比较,丙泊酚麻醉各Trk B激动剂亚组(Pro4D、Pro8D)组子鼠海马区BDNF和Trk B阳性细胞较少、染色较浅。与相应的溶媒亚组(CN、Pro4N、Pro8N)相比,Trk B激动剂各亚组(CD、Pro4D、Pro8D)子鼠海马区BDNF和Trk B阳性细胞较多、染色较深。结论:孕晚期丙泊酚麻醉SD母鼠对子代大鼠学习记忆功能有损害作用,且呈一定的时-效关系,子代大鼠海马区BDNF的表达下调。其机制可能与下调海马Trk B表达,从而下调BDNF的表达,进而抑制学习记忆有关,即孕晚期母体接受丙泊酚麻醉通过抑制“BDNF-Trk B”途径损害SD大鼠子代学习记忆功能。但该通路在其中的确切作用有待进一步深入研究。
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