百合作为一种重要的商品花卉,在市场上颇受欢迎,开展多倍体育种可以从一定程度上提高百合的观赏品质、增强其抗逆性。本论文对铁炮百合’清纯’(Lilium longiflorum‘Qingchun’)体细胞加倍技术、OT百合可产生未减数配子品种的筛选及其杂交技术和杂交后代的染色体组成分析等进行了研究,为百合倍性育种技术的完善提供了一定的思路,获得的优良株系为新品种的培育奠定了基础。主要研究结果如下:1、建立铁炮百合’清纯’的无菌再生体系,对外植体的灭菌方式及丛生芽的切割方式进行优化,结果显示二次灭菌(即先用次氯酸钠溶液灭菌一段时间,蒸馏水洗净后再次灭菌)可以显著降低污染率。另外,不同的切割方式对丛生芽的继代增殖有一定的影响,将丛生芽切割成包含1个不定芽的芽块时,其增殖系数为6.90±0.35,显著高于切割成含2个或3个不定芽的芽块。2、研究了铁炮百合’清纯’试管小鳞茎的体细胞加倍技术,并对诱变剂的种类、浓度以及处理时间进行筛选。结果显示:预培养12d左右较适宜染色体加倍;秋水仙素浓度0.1%、处理时间36h时,诱导率最高,达14.44±5.09%;氨磺乐灵浓度0.01%、处理时间24h时,诱导率最高,达12.22±3.85%;但氨磺乐灵对铁炮百合’清纯’的毒害作用较严重,多数鳞片在氨磺乐灵浸泡后丧失了分化能力,鳞片褐化及腐烂的情况严重,而秋水仙素处理对鳞片分化的损害程度较轻。总体而言,秋水仙素的诱变效果优于氨磺乐灵。3、对铁炮百合’清纯’染色体加倍后的多倍化效应进行初探,结果显示:四倍体植株的叶片长度、宽度及厚度均较二倍体有一定程度的提高,体现了多倍体的巨大性;对四倍体植株进行继代增殖、生根,变异植株在初期的增殖及生根均较困难,初代四倍体丛生芽的增殖系数仅为2.90±0.03,生根率为73.33±3.34%,均显著低于二倍体植株;随着继代次数的不断增加,多倍体的增殖能力得到了一定的恢复,第二代四倍体丛生芽的增殖系数提高至3.73±0.07,但总体慢于二倍体植株(增殖系数为6.01±0.32),可见多倍体植株具有明显的生长延缓的特点。4、对OT百合可产生2n花粉的品种进行筛选,并比较OT百合的花蕾于高温期所处的减数分裂阶段与2n花粉产生的相关性,结果发现:处于小孢子母细胞时期的OT26花蕾受到高温作用后,并未产生2n花粉;而高温作用于细线期-双线期的OT14、OT15、OT23和OT41这四个品种则产生了一定比例的2n花粉,可见高温作用的时期对于2n花粉的产生有一定的影响。5、开展不同倍性OT百合与东方百合之间的杂交,结果表明OT百合柱头粘液的分泌量与人工授粉结果存在一定的正相关性,柱头粘液对于杂交授粉时的花粉萌发有一定的促进作用;’Cocossa’与’Siberia’杂交存在受精前障碍,在柱头乳突细胞、花柱通道细胞、胚珠以及花粉管中均有不亲和现象的发生,且正反交差异明显,反交时花粉管不能进入胚珠;OT系列与东方百合杂交,约30d后部分膨大的子房逐渐皱瘪和枯黄,说明杂种胚出现了一定程度的败育现象,应及时进行胚拯救。6、对三倍体杂种OT百合4#的正反交后代进行染色体组成分析,结果显示:相比于做父本,4#做母本与东方百合杂交所得的子代染色体数目的类型更丰富(共8种类型),染色体数在24条至33条之间。由此可见,胚囊对染色体数目变化的忍耐性较强。另外,子代染色体数目趋向于二倍体的类型更多,且非整倍体的比例远高于整倍体。对4#做亲本杂交所得的子代株系的分化情况进行观测,结果显示:不同株系间的分化方式及速度与亲本类型和子代株系的染色体数目有一定的相关性,其中4#与Raizan‘3’杂交所得的株系多需经愈伤阶段再分化,而其余株系多为直接分化不定芽;就分化速度而言,4#与‘Entertainer’杂交所得的株系分化速度最快;另外染色体数目趋向于三倍体的株系分化速度较快。