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血清抗中性粒细胞胞浆抗体(Anti-neutrophil Cytoplasmic Antibodies，ANCA)是一类针对中性粒细胞主要颗粒成分和单核细胞溶酶体的自身抗体。依据间接免疫荧光的着染部位不同分为中性粒细胞胞浆型(C-ANCA)和核周型(P-ANCA)两种。胞浆型的主要靶抗原为蛋白酶(Proteinase，PR-3)；核周型的主要靶抗原为髓过氧化物酶(Myeloperoxidase，MPO)。以往认为ANCA是以Wegener肉芽肿(Wegener’s Granulomatosis，WG)为代表的系统性坏死性血管炎的血清标志抗体，作为该病的诊断指标及病情活动的评定指标，对病情的缓解、复发具有一定的预测价值。由于许多其他疾病中也检测到了ANCA，如自身免疫性疾病中的系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、硬皮病、皮肌炎等，因而现在认为血清中ANCA不仅与系统性小血管炎有明显的相关性，而且与自身免疫性疾病也有一定的关联性。 病例与方法 122例均为我院门诊或病房(2003．1～2004．1)的患者。分为两组，结缔组织病组共84例，其中系统性红斑狼疮36例(包括19例狼疮性肾炎)，类风湿关节炎16例，皮肌炎12例，硬皮病8例，干燥综合征8例，重叠综合征3例，混合浙江大学2侧衬届硕士学位论文性结缔组织病1例。皮肤血管炎组38例，其中过敏性紫斑14例，结节性红斑12例，变应性皮肤血管炎7例，Behect病5例。所有患者均符合《临床皮肤病学》(赵辨主编，2001年第3版)所列上述疾病的诊断标准。对照组30例为我院的健康志愿献血人员。 采用间接免疫荧光法(IIF法)检测ANCA。试剂盒购自德国欧蒙公司。将患者血清、正常人血清用o.olmof几PH7.4的磷酸缓冲液(P BS.Tween)l:加稀释后，吸取25ul滴加于生物薄片上，室温孵育30而n，用PBS.Tween缓冲液流水冲洗，以去除未结合的样品，然后将其浸泡于PBS.爪枕en溶液中5而n以上。加入20ul荧光标记的抗人Ig。室温孵育30min，避光反应。用PBS.Tween洗去未结合的抗体。然后将其浸泡于PBS.Tween溶液中5而n以上。经冲洗、甘油封片。荧光显微镜下观察，以中性粒细胞中有特异性绿色荧光判定为阳性，依荧光染色强度分为+~+++。荧光形态分两种:胞浆不均匀顺粒样着色，并在细胞核核叶之间有重染者称之为胞浆型(C.ANCA)，环绕着细胞核着色则称之为核周型伊一ANCA)。 结果与讨论 本文ANCA阳性染色均为核周型ANCA(P.ANCA)，结缔组织病组阳性率为46.4%，在皮肤血管炎中组阳性率为13 .2%，正常对照组均为阴性，疾病组和正常对照组之间比较均存在明显差异(P<0.001和P<0.05)。 84例结缔组织病患者中，系统性红斑狼疮(Syste而cL即usE口th ennatosus，sLE)36例，阳性20例(阳性率为55.6%);类风漫性关节炎扭址叨城。idAd‘tis，RA)16例，阳性8例(阳性率为50%)，其病史明显长于阴性患者，病情较重，且多处于疾病的活动期;皮肌炎口~atomyosids，DM)12例，阳性率16.7%;系统性硬皮病口拍g限ssive Syste而。Scleroderma， PSs)8例，阳性率25%;干操综合征(Sjog限ns”如me，55)8例，阳性率50%;重叠综合征(overi即s”山旧m。，05)3例，阳性率“.7%;混合性结缔组织病伽ixed CO]山时沁tive五ssue Disease，MC，)1例，为阳性。 血管炎组病例共有38例，过敏性紫斑(劫越由yl.时oidh叩坦气妙)患者14例，浙江大学2以月届硕士学位论文血清ANCA阳性2例，阳性率为143%;结节性红斑担斗也ema Nodo~，EN)12例，阳性2例，阳性率16.7%;变应性皮肤血管炎(Alle堪ic CutsLncous vasculitis，Aev)7例，阳性l例，阳性率1 4.3%;其次为白塞氏病(Behect’5 Disease，BD)5例，均为阴性。 36例SLE患者中，ANCA阳性20例，均处于疾病活动期，其中15例ANA七1:80，为高滴度阳性，17例抗ds.DNA抗体(+)，9例抗Sm抗体(+)，20例患者ESR全部升高，17例C3下降，14例C4下降。而ANCA阴性患者16例，仅有6例AN枪1:80;8例抗ds一DNA抗体(+)，8例抗Sm抗体(+)，12例ESR升高，6例C3下降，5例C4下降。统计学处理显示，ANCA阳性组与阴性组进行比较，有关提示SLE病情活动的指标如ANA刁:80、抗ds.DNA抗体阳性、血沉(ESR)加快和补体C3、C4降低等在两组之间均存在显著性差异，提示ANCA对SLE病情活动状态检测有一定的意义。 36例SLE患者中未合并狼疮肾的17例，其中ANCA阳性者3例，弱阳性3例阳性率35.3%;19例合并狼疮肾的患者中，ANCA强阳性者n例，阳性者3例，阳性率为73.7%。经xZ检验，P<0.05，有显著性差异。 结论 1 .ANCA在结缔组织病与皮肤血管炎中阳性率分别为46.4%和15.8%，提示ANCA在这两组疾病发病机理中有一定作用。 2.ANCA的检测对SLE的病情活动的监测和判断是否合并肾脏受损具有一定的意义。 3.ANCA可作为评价RA病程长短及其病情严重性的一项指标.