【摘 要】
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建立高频稳定的再生体系是基因转化的前提和基础.该研究以草莓为试材,着重筛选分化培养中添加的激素.建立了品系D高频稳定的叶片离体再生体系,再生频率达90%以上.培养 基成
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建立高频稳定的再生体系是基因转化的前提和基础.该研究以草莓为试材,着重筛选分化培养中添加的激素.建立了品系D高频稳定的叶片离体再生体系,再生频率达90%以上.培养 基成分:MS+BA<,3.0mg/L>+IBA<,0.3mg/L>.丰香、长虹再生频率始终都低于30%.由于品种间对抗生素(特别是卡那霉素)的耐性有差异,故在转化之前首先进行抗生素敏感性试验是必要的.该研究转化所选的试材为品系D,经试验确定卡那霉素浓度为25mg/L,头孢霉素浓度为200mg/L.在转化过程中,所用的菌株为EHA<,105>、LBA<,4404>,分别携带报告基因(GUS基因)和目的基因(ACC合酶反义 基因).菌株类型是决定转化能否成功的关键.在ACC合酶反义基因转化过程中,按照报告基因优化的体系进行操作,未能获得抗性芽.后经一系列改进,如增加创伤面、延长共培养时间、推迟选择等,最终获得1个抗性芽,经PCR检测有特意片段存在,检菌实验结果显示无农杆菌污染,获得了草莓转基因植株.
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