CXCL12/CXCR4轴与胃癌细胞侵袭转移关系的研究

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目的:研究趋化因子CXCL12对胃癌BGC-823细胞珠体外侵袭转移能力的影响,进一步探讨CXCL12/CXCR4轴在胃癌侵袭转移过程中的机制,以及作为提示胃癌侵袭转移的分子生物学指标或药物治疗靶点的可能性。方法:体外培养胃癌BGC-823细胞,根据CXCL12浓度的不同,将试验分为5组:空白对照组、25ng/ml CXCL12组、50ng/mlCXCL12组、100ng/mlCXCL12组、200ng/mlCXCL12组。采用Transwell法细胞侵袭实验检测不同浓度组CXCL12诱导胃癌细胞侵袭转移的能力;采用real-time PCR法检测不同CXCL12浓度组胃癌细胞中MMP-2基因mRNA表达的变化;采用免疫荧光法检测不同CXCL12浓度组胃癌细胞中MMP-2蛋白的表达。结果:1.Transwell法细胞侵袭实验结果显示:与空白对照组比较,CXCL12不同浓度组穿膜细胞数均显著增多(P均<0.001);CXCL1250ng/ml、100ng/ml、200ng/ml组穿膜细胞数均显著高于25ng/ml组(P均<0.001);CXCL12100ng/ml、200ng/ml组穿膜细胞数均显著高于50ng/ml组(P均<0.001);CXCL12100ng/ml组与200ng/ml组间穿膜细胞数差异无统计学意义(P>0.05)。2.real-time PCR结果显示:与空白对照组比较,CXCL12不同浓度组MMP-2mRNA的相对表达量均显著增多(P均<0.001)。CXCL1250ng/ml、100ng/ml、200ng/ml组MMP-2mRNA的相对表达量均显著高于25ng/ml组(P均<0.001);CXCL12100ng/ml、200ng/ml组MMP-2mRNA的相对表达量均显著高于50ng/ml组(P均<0.001);CXCL12100ng/ml组与200ng/ml组间MMP-2mRNA的相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。3.免疫荧光法检测结果显示:随着CXCL12浓度的增加,细胞质中的绿色荧光强度呈逐渐增强现象,当CXCL12的浓度达到100ng/ml,绿色荧光最明显,再增加CXCL12的浓度,细胞质中的绿色荧光强度不再增强。结论:CXCL12/CXCR4轴可以增强胃癌细胞的体外侵袭能力。其机制可能是CXCL12/CXCR4轴诱导胃癌细胞增加MMP-2表达,促进ECM降解,破坏基底膜,从而促进胃癌细胞的侵袭转移。
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