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恶性肿瘤是当今世界损害人类健康的重大疾病,一直是医学研究领域的热点。在威胁人类健康的恶性肿瘤中,肺癌位居首位。世界范围内,每年因肺癌死亡的人数高达百余万,超过结肠癌、乳腺癌和前列腺癌的总和。2019年1月我国国家癌症中心发布《2015年中国恶性肿瘤流行情况分析》,报告中国肺癌患者年发病数接近八十万。尽管在诊断和治疗手段上不断有新的进展,但有50%的非小细胞肺癌(Non-small-cell lung cancer,NSCLC)患者确诊时已伴有远处转移,涉及脑、骨、肝脏以及肾上腺、皮肤、眼部等部位。目前的治疗手段包括手术切除、放化疗及分子靶向治疗、免疫治疗等。但部分患者确诊时已难以手术,而放化疗、分子靶向治疗常伴随多种不良反应及耐药,对患者生存时间的延长亦有限。肺癌患者一旦出现远处转移,预后极差,中位生存时间少于一年。迄今尚无针对晚期转移性肺癌的治愈方法,如何破解晚期肺癌无药可治的困局,是提高患者生存质量、降低死亡率的关键。已有许多来源于天然植物的抗癌药物,如紫杉醇、喜树碱等,对肺癌发挥良好的治疗效果。但随着陆地生物资源的不断减少,科学家逐渐将研究方向转向海洋生物。其中海洋藻类的研究和开发具有广阔的应用前景,为抗肿瘤药物的发现提供了丰富的资源。岩藻黄质(Fucoxanthin,FX)和鹅掌菜酚(Eckol,EC)是从海带中提取的生物活性成分。已有研究显示,FX、EC具有抗肿瘤活性,可能是潜在的肿瘤治疗药物。迄今为止,尚无FX、EC与肺癌细胞侵袭迁移相关的研究报道。为此,本课题在体内外水平,对FX和EC对人肺癌细胞侵袭迁移的影响及相关分子机制开展了研究。目的:在体内外水平,探究自海带提取的FX、EC对人肺癌细胞侵袭迁移的影响及其分子机制。方法:体外培养人肺癌细胞,CCK-8法检测肿瘤细胞的存活率;划痕实验检测肺癌细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测肺癌细胞的侵袭和迁移能力;对FX、EC处理的A549细胞进行蛋白组学检测,定量观察各组细胞的蛋白质差异表达情况,寻找转移相关信号通路;RT-PCR和Western blot法检测转移相关信号通路的mRNA及蛋白表达;构建A549细胞转移裸小鼠模型,考察药物对肺癌A549细胞转移的影响。结果:海带提取物FX、EC可降低人肺癌A549、H1299、H446等细胞的存活率,该作用具有时间-浓度依赖性;FX、EC可显著抑制人肺癌A549、H1299、H446等细胞的侵袭迁移能力;蛋白质组学分析显示,FX组筛选到256个差异蛋白,其中131个蛋白表达上调(FX/Control>1.50),125个蛋白表达下调(FX/Control<0.67);EC组筛选到217个差异蛋白,其中118个蛋白表达上调(EC/Control>1.50),99个蛋白表达下调(EC/Control<0.67),与肿瘤细胞侵袭迁移相关的TIMP-2蛋白的表达显著上调。生物信息学分析显示,这些差异蛋白和细胞增殖、细胞凋亡、RNA转录、蛋白质翻译及修饰、金属酶活性调控、新血管生成和细胞运动等密切相关。通过RT-PCR和Western blot法进一步发现,FX、EC可调控人肺癌A549细胞上皮-间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)相关因子(Snail、Twist、MMP-2、Fibronectin、N-cadherin及TIMP-2)的表达,这与药物调控PI3K/Akt/NF-?B信号通路相关;FX、EC连续灌胃给药后,与顺铂相比,其安全性良好。与对照组比较,转移结节数量显著降低。结论:海带提取物FX、EC可在体内外水平抑制人肺癌细胞转移。其作用机制可能与调控PI3K/Akt/NF-?B信号通路,抑制人肺癌细胞的上皮-间质转化相关。