胰腺是横卧于上腹后壁的狭长型腺体,全长约14-20cm,其上下方被十二指肠包绕,毗邻胃、脾等脏器,属于消化系统中具有外分泌和内分泌功能腺体,外分泌腺分泌多种消化酶消化分解食物中的糖、蛋白质和脂肪等;内分泌腺分泌多种激素如胰岛素等,调节人体的多种重要生理功能。因此,胰腺癌变分为内分泌细胞癌变和外分泌细胞癌变,内分泌细胞的癌变,可以称为神经内分泌癌,而外分泌细胞的癌变,才为普通意义上的胰腺癌。胰腺癌（pancreatic cancer）,又称为胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC）,2018年美国癌症协会发布的数据显示,美国胰腺癌新发病例数男性列第11位、女性列第8位,居恶性肿瘤死亡率第4位。有研究现象表明胰腺癌在未来有望超过乳腺癌成为第三大致死癌症。中国国家癌症中心最新统计数据也显示,胰腺癌位列中国城市男性恶性肿瘤发病率的第8位,居北京市和上海市人群恶性肿瘤死亡率的第5位。胰腺癌在老年人中的发病率较高,且治愈率不到20%,五年生存率低于5%。引发胰腺癌的因素尚不完全清楚,一些环境因子可能对胰腺癌的发生和发展有关,但只有烟草经证实对胰腺癌的生成有重要促进作用。与此同时,基因的影响可能大于环境的影响。目前尚无可靠的筛查机制和试剂筛选普通人群和胰腺癌早期人群,在可治愈阶段进行预防活早期诊断极为困难,患者很少出现症状,肿瘤不显示敏感和特异性标志物。胰腺癌的药物开发受阻,治疗方法有限,原因在于基因组、表观遗传和代谢水平的复杂,并且存在多个通路的相互影响和串扰。此外,在肿瘤内环境中,存在肿瘤细胞和基质细胞的相互作用,这对肿瘤的治疗带来了新的挑战。少于20%的病人肿瘤可以通过手术切除,并且可以通过辅助治疗延长生存期,但是约80%的患者在术后会复发,并且有极大的可能患者死亡。地胆草（Elephantopus scaber L.）,属菊科地胆草属脂物,又名苦地胆、土蒲公英,鹿耳草等,广泛分布于亚洲、非洲和美洲等地区,在中国有广泛的分布,如浙江、江西、福建、广州等,常生长于山林,路旁等。地胆草在中国南方的民间有很长的食用历史,多被作用于煲汤的原材料。地胆草还有重要的药用价值,其根部可以入药,味苦、性寒,在中医里认为其具有清热、解毒、凉血、利湿等功效,被广泛用于缓解各种炎症等,并且被应用在各种复方制剂中。地胆草含有许多化学有机成分,如有机酸、黄酮、倍半萜内酯、三萜和甾醇等,其中倍半萜内酯和咖啡酰基奎宁酸类衍生物为主要活性成分。其中的倍半萜内酯去氧地胆草素（Deoxyelephantopin,DET）,又称为去氧地胆草内酯,被认为具有一定的抗肿瘤作用。据文献报道,去氧地胆草素在肺癌,结直肠癌,三阴乳腺癌、肝癌、骨肉瘤中都有研究,例如通过NF-κB、STAT3、ERK,和PI3k/AKT/m TOR等通路,引起癌症细胞的凋亡、自噬等。但去氧地胆草素在胰腺癌中的作用还鲜有报道。我们的主要研究结果如下:1.去氧地胆草素影响细胞增殖、周期、凋亡和DNA损伤的能力我们通过去氧地胆草素对体外胰腺癌细胞系的影响进行探究它对胰腺癌细胞增殖、周期、凋亡和DNA损伤的能力。首先我们通过MTT检测、Ed U掺入实验和平板克隆等实验,验证了在加入DET后,细胞的增殖能力减弱,细胞的自我更新能力降低;随后我们利用流式细胞术检查了DET对胰腺癌细胞周期的影响,可以看到加入DET后细胞周期阻滞在G2/M期;通过流式细胞术检测到了加入DET后会使胰腺癌细胞产生凋亡,凋亡相关蛋白也发生了相应的变化;最后利用彗星实验、γ-H2AX免疫荧光和Western blot检测DNA损伤相关蛋白,验证了加入DET后,细胞会发生双链的损伤。2.去氧地胆草素和吉西他滨的联合作用首先我们检验了联合用药对胰腺癌增殖的影响,可以通过显微镜照片观察到,在加入DET和吉西他滨后,细胞的数量明显减少,两种药物联合作用下,细胞的数量最少。通过MTT定量检验也能证实,在DET和吉西他滨联合作用的情况下,将大大抑制胰腺癌的增殖,且抑制效率比两种药分别作用高。随后通过流式细胞检测细胞的周期阻滞情况,结果显示与单独加入DET和吉西他滨的胰腺癌细胞相比,联合用药后的胰腺癌细胞G2/M期的周期阻滞增加。最后用流式细胞仪检测凋亡情况,也可以看到联合作用后胰腺癌细胞发生凋亡的更多。说明去氧地胆草素和吉西他滨联合用药减弱细胞增殖、增加G2/M期阻滞以及加强细胞的凋亡。3.去氧地胆草素影响胰腺癌细胞成瘤能力我们利用了Soft agar软琼脂克隆形成实验,初步检测了细胞体外自我更新能力,发现加入DET后细胞的成瘤能力受到了抑制。随后我们检测DET对小鼠体内成瘤能力的影响,我们利用Capan-1对小鼠进行皮下注射,使其成瘤。通过每天对小鼠腹腔注射DET,20天后,观察与对照组小鼠形成的肿瘤差异。我们可以发现,与对照组相比,注射DET的一组明显肿瘤的体积和重量都受到了抑制。