费氏弧菌生物发光在水质毒性检测上的应用研究

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水是生命之源,随着经济的快速发展,环境污染的问题越来越突出,水体污染成为人的安全和健康的重大威胁。监测水体污染情况,控制水体质量,日益受到人们的关注,特别是对水体综合毒性的评价,成为水质监控的重要内容。对于水体中微生物毒素的检测,物理、化学方法应用不便,而传统的水体综合评价存在耗时长、成本高、重复性差的缺陷。本文的研究目的是利用费氏弧菌发光来检测水中的微生物毒素和水体的综合毒性,打破传统方法的局限,为建立水质监控的新方法开辟新的思路。本课题研究了费氏弧菌培养状态与培养基成分、培养温度、摇床转速和接种量的关系,探索了费氏弧菌冻干粉制备与冻干保护剂及其用量的关系,并对费氏弧菌的培养条件和冻干粉制备条件进行了优化。确定了费氏弧菌冻干粉的制备条件:ISO11348标准培养基;培养温度为28℃;转速为250rpm;接种量为OD600=0.015-0.025;冻干保护剂为0.2mg/L蔗糖溶液;保护剂用量为2%(体积比),所得冻干粉的稳定性和敏感性均达到商业化应用水平。应用本课题中制得的冻干粉检测重金属离子和有机溶剂的毒性,表明费氏弧菌发光强度抑制率与这些物质的浓度呈正相关,抑制率为20%-80%时,抑制率与浓度对数值呈线性关系。本课题首次探讨了费氏弧菌发光与微生物毒素——黄曲霉毒素的关系:黄曲霉毒素浓度的对数值与费氏弧菌发光的抑制率呈线性关系,依据所得的回归方程可以快速准确地检测不同微生物产毒素的情况:6株不同来源的黄曲霉菌株产毒素的水平,以黄曲霉毒素含量表示的毒素量在14.94-46.45mg/L之间;1株米曲霉不产毒素。费氏弧菌发光强度的改变可以较准确地反映微生物产毒素的能力,尤其是微生物产黄曲霉毒素的能力,这为在工农业生产中快速检测黄曲霉毒素提供了新的线索,有望发展成为一种检测黄曲霉毒素的新技术。
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