皱皮柑果皮中总黄酮的提取、纯化及初步鉴定

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本文以皱皮柑为原料,研究了皱皮柑皮中总黄酮的最佳提取工艺条件和纯化方法,并通过显色反应、高效液相色谱法(HPLC)对皱皮柑中的总黄酮进行了初步鉴定。主要研究结果如下:1.利用硝酸铝体系与黄酮化合物形成络合物的原理,以芦丁为对照品,采用分光光度法测定皱皮柑皮中总黄酮的含量,该方法简单快速,为探索最佳提取和纯化工艺的指标控制提供了快速有效的评价方法。采用该方法测定了不同时期皱皮柑果皮中总黄酮含量,发现9月青果皮中的总黄酮含量最高,随着时间的延后,总黄酮含量呈下降趋势,综合各方面因素考虑,选择10月的果实作为提取原料较为适宜。2.采用回流提取和超声辅助提取两种方法对总黄酮的提取条件进行了系统研究,通过单因素和正交试验确定了各自的最佳工艺条件,即回流的最佳工艺条件为:20目的橘皮粉末与40%的乙醇以料液比1:30混合,在70℃水浴中回流提取60min后可达到最佳提取效果,总黄酮平均得率为1.54%;超声辅助提取的最佳工艺条件为:20目的橘皮粉末与50%的乙醇以料液比1:50混合,在50℃的条件下超声处理20min,总黄酮平均得率为1.52%。3.在获得皱皮柑总黄酮粗提物后,对其纯化方法进行了探索,结果表明:以60-100目的聚酰胺树脂作为吸附材料,上样流速为2mL/min,上样后静态吸附30min后,以3BV的蒸馏水淋洗柱子,然后用2BV 40%的乙醇溶液以1mL/min的速度进行洗脱,即可达到理想的纯化橘皮总黄酮的效果。4.在对纯化后的样品进行显色反应的基础上,采用HPLC法对总黄酮成分进行检测,发现在皱皮柑的黄酮类物质当中,主要成分为新橙皮苷,占皱皮柑总黄酮含量的85%,其次为柚皮苷,占总黄酮的12.3%,此外还有少量的橙皮苷。
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