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第一节G-CSF增效超声微泡促进大鼠血管新生的剂量选择目的筛选粒细胞集落刺激因子(G-CSF)联合超声微泡促进大鼠心肌血管新生的最佳有效剂量。方法40只健康成年Wistar大鼠随机分为5组,给药方案分别为A组:5ug/kg×4天;B组:10ug/kg×1天;C组:15ug/kg×1天;D组:20ug/kg×1天;E组:对照。同时各组给予超声微泡治疗。2周后处死大鼠取材,HE染色光镜观察心肌结构变化,免疫组化法检测心肌组织中CD34表达,评定心肌血管新生疗效。结果C组、D组心肌组织中均可见大量CD34阳性颗粒表达,新生血管较多,其余各组表达相对较少,新生血管相对较少,微血管计数C组和D组最多,但C组相对于D组差异无显著性(P>0.05)。结论采用C组的方案单次注射G-CSF 15ug/kg为最佳有效剂量。第二节超声破坏微泡联合G-CSF促进正常大鼠血管新生的实验研究目的探讨超声破坏微泡联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)促进正常大鼠心肌血管新生的有效性。方法40只健康成年Wistar大鼠随机分为4组。A组在超声微泡治疗前一天行G-CSF皮下注射预处理,B组仅行超声微泡治疗,C组仅行G-CSF皮下注射,D组为对照。于治疗后2周处死大鼠取材,HE染色光镜观察心肌结构变化,免疫组化法检测心肌组织中VEGF及CD34表达,评定心肌血管新生疗效。结果A组心肌中见大量VEGF和CD34表达,新生血管较多;B组心肌中有部分VEGF和CD34表达,新生血管相对较少;C组及D组仅有极少量VEGF和CD34表达,未见明显新生血管。结论超声破坏微泡可刺激心肌内源性VEGF分泌,促进心肌血管新生,G-CSF能明显增强其血管新生作用。第三节超声破坏微泡联合G-CSF促进心肌梗死大鼠血管新生的实验研究目的:探讨超声破坏微泡联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)刺激大鼠梗死心肌血管内皮生长因子(VEGF)分泌、促进血管新生的有效性。方法:心肌梗死模型Wistar大鼠40只,随机分为4组,超声+微泡造影剂+ G-CSF(A组);超声+微泡造影剂(B组);单纯G-CSF(C组);单纯手术(SA)(D组)。于治疗后2周处死大鼠取材,采用免疫组化法检测心肌组织CD34的表达,并在显微镜下计数心肌内新生血管密度(MVD)。采用ELISA及Western blot法检测心肌组织内VEGF蛋白表达情况。结果:免疫组化结果显示A组心肌组织中有大量CD34表达,新生血管最多,MVD计数为(231.20±24.48)个/高倍镜视野,明显高于其余各组(P<0.05)。ELISA检测结果显示A组心肌组织中VEGF蛋白表达量为(3.14±0.21)ng/g,明显高于其余各组(P<0.05)。Western blot结果显示A组可见一大小约21KD的蛋白质条带,其余各组可见同样大小弱的蛋白质条带。结论:超声破坏微泡可刺激缺血心肌内源性VEGF分泌,促进心肌血管新生,联合G-CSF能明显增强其血管新生作用。