目的:柯萨奇病毒B组3型（coxsackievirus B3,CVB3）在青少年急慢性病毒性心肌炎中是最常检出的病原体,是众多心肌炎已知的病因之一。CVB3是一种嗜心肌病毒,在诱发心肌炎后可导致人猝死和心力衰竭。因此,进一步深入筛选新的抗CVB3药物,并探讨其抗病毒机制,对病毒性心肌炎的治疗至关重要。天然植物生物碱黄连素（Berberine,BBR）是一种具有广泛生物活性的植物化学物质,具有抗癌、抗炎和抗病毒活性。这启发我们BBR可能是一种潜在的治疗CVB3的药物,因此本研究旨在探讨BBR对CVB3的抗病毒作用,并探讨其可能的机制。在本研究中初步证明了BBR可在体外抑制CVB3的复制,有效抑制病毒诱导的细胞病变作用并且降低子代病毒的产生。本文初步探讨了其抗病毒效果可能相关的机制,为CVB3治疗提供了新的研究思路和临床策略。方法:1.采用CCK8法选取合适的BBR作用浓度。2.进行CVB3-eGFP重组病毒的拯救,并用拯救后的病毒与CVB3的Nancy株共同作用于Hela细胞,以此为对照组,实验组在感染病毒后加入30μM浓度的BBR通过逆转录-聚合酶链反应（q RT-PCR）和Weste rn blot检测CVB3 VP1 m RNA和蛋白的表达;通过TCID50法检测细胞上清中CVB3病毒滴度,以证明BBR对CVB3复制的影响。3.CVB3感染Hela细胞为对照组,实验组分别给予10μM、20μM、30μM不同浓度的BBR,q RT-PCR和Western blot检测CVB3 RNA和蛋白的表达,验证BBR的抗病毒效果是否存在浓度依赖性。4.建立体外CVB3感染Hela细胞模型,通过病毒感染前加药、病毒感染的同时加药、病毒感染后加药这三种不同加药方式检测BBR对CVB3复制的哪一阶段起作用。5.以正常Hela细胞作为对照组,用CVB3感染对数期生长状态良好的Hela细胞,应用q RT-PCR法,检测CVB3感染对基因NLRP3、casp as-1和IL-18、IL-1β、干扰素IFN-α、IFN-β以及几种干扰素刺激因子的表达影响。6.选用CVB3病毒感染对数期生长状态良好的Hela细胞,应用q RT-PCR法,检测BBR对基因NLRP3、IL-1β、caspas-1和IL-18、IFN-α、IFN-β以及几种干扰素刺激因子表达的影响。结果:1.在BBR浓度为30μM时对Hela细胞无明显的细胞毒性;2.CVB3 Nancy株病毒滴度TCID50=-7.75,成功进行CVB3-e GFP的病毒拯救,并且拯救后的病毒TCID50=-6.5。q RT-PCR和Western blot的结果表明BBR对CVB3的病毒复制有明显的抑制作用;3.三种给药方式结果证明在感染病毒2小时后加入BBR对CVB3复制相关基因VP1的RNA和蛋白表达的抑制效果最明显,提示BBR的抗病毒复制效果可能与影响病毒生物合成有关;4.BBR可抑制CVB3感染后炎症反应相关因子caspas-1和IL-18、IL-1β、IFN-α、IFN-β的表达,但对NLRP3、DDX58、DDX60、IFIH1和I FI144的表达无影响。结论:1.成功拯救了CVB3-e GFP重组病毒。2.BBR具有抗CVB3复制的作用,并且可能影响病毒生物合成阶段,而且在无细胞毒性的范围内浓度越高抗病毒效果越好。3.BBR可能通过抑制CVB3病毒感染后引起的炎症反应相关因子表达而发挥抗CVB3的作用。