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目的:本研究从长链非编码RNA SNHG3及其靶基因ZEB1的角度,深入探讨BMP9抑制乳腺癌细胞迁移与侵袭的分子机制。方法:采用lncRNA表达谱芯片检测BMP9处理前后乳腺癌MDA-MB-231细胞中lncRNA的表达改变,寻找有显著表达差异的lncRNA,再经筛选、qRT-PCR验证,并结合生物信息学分析乳腺癌临床样本,观察SNHG3与乳腺癌的相关性;使用荧光原位杂交技术观察SNHG3的细胞定位;在MCF-7,MDA-MB-231细胞株中转染siRNA片段降低SNHG3内源性表达,同时在MCF-7,MDA-MB-231细胞株转染SNHG3质粒构建过表达细胞株;通过克隆形成实验检测乳腺癌细胞的增殖能力;划痕愈合实验,Transwell实验检测乳腺癌细胞迁移与侵袭能力。通过StarBasev2.0数据库预测SNHG3与miR-186-5p有直接结合位点,结合文献和数据库分析发现miR-186-5p能直接调控靶基因ZEB1的表达,采用双荧光素酶报告基因实验及Western blot验证SNHG3对miR-186-5p和ZEB1的调控作用;qRT-PCR、Western blot检测EMT通路相关标志物的变化。在乳腺癌细胞中过表达ZEB1,通过上述生物学功能实验进一步探究ZEB1对乳腺癌的影响。将Ad-BMP9与过表达SNHG3质粒共转染乳腺癌细胞中,通过Transwell实验检测过表达SNHG3对BMP9抑制乳腺癌迁移,侵袭能力的变化。最后采用裸鼠皮下成瘤模型在小鼠体内探究SNHG3对乳腺癌的作用,将对照组和敲低SNHG3的乳腺癌细胞MCF-7分别接种至雌性裸鼠皮下,观察瘤体生长情况。35天后收集瘤体,通过qRT-PCR检测SNHG3的表达,Western blot检测ZEB1、MMP2、Snail的表达;免疫组化检测PCNA、E-cadherin、Vimentin等在瘤体中的表达情况。结果:结合lncRNA表达谱芯片和qRT-PCR结果,发现BMP9处理乳腺癌细胞后SNHG3表达量显著下降;利用Oncomine与TCGA数据库分析,发现:与正常人群相比,乳腺癌患者癌组织中的SNHG3呈现高表达;同时与永生化的正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,在乳腺癌细胞MCF-7,MDA-MB-231中SNHG3同样呈现高表达。FISH结果显示SNHG3主要定位于乳腺癌细胞胞质。qRT-PCR实验证实MCF-7,MDA-MB-231细胞成功过表达SNHG3;通过划痕愈合实验,Transwell实验发现敲低SNHG3内源性表达,能够抑制乳腺癌细胞的迁移与侵袭;而过表达SNHG3后,乳腺癌细胞的增殖,迁移与侵袭能力增强。qRT-PCR和Western blot检测EMT标志物的mRNA和蛋白水平,发现SNHG3能够促进乳腺癌细胞向EMT转变。双荧光素酶报告基因实验证实SNHG3与miR-186-5p有直接结合位点,并且miR-186-5p也能与ZEB1直接结合。我们发现过表达SNHG3后ZEB1的表达量增加,敲低SNHG3后ZEB1的表达量减少;在rescue实验中,乳腺癌细胞中转染pcDNA3.1+/SNHG3-WT部分逆转si-SNHG3对ZEB1表达的降低,而转染pcDNA3.1+/SNHG3-MUT后ZEB1的表达基本无改变,因此SNHG3通过竞争性结合miR-186-5p上调ZEB1促进乳腺癌细胞向EMT转变,增加迁移与侵袭能力;另外Transwell实验证明共转染过表达BMP9腺病毒与SNHG3过表达质粒可部分逆转BMP9对乳腺癌细胞迁移与侵袭的抑制作用。体内实验结果表明:在乳腺癌细胞MCF-7中降低SNHG3的内源性表达后,其体内成瘤能力受到抑制;qRT-PCR结果证实移植瘤内SNHG3表达量显著减少;Western blot试验结果表明敲低SNHG3抑制ZEB1、Snail、MMP2的表达,免疫组化试验结果表明敲低SNHG3促进E-cadherin、抑制Vimentin、PCNA的表达。结论:BMP9通过下调LncRNA SNHG3抑制乳腺癌细胞的迁移与侵袭能力,且其机制与EMT通路相关。