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珊瑚具有显著的生物多样性,从中分离到多种生物活性物质。海洋真菌往往能产生与陆地真菌不同的活性物质,研究推测共附生真菌可能是宿主活性物质的真正生产者。徐闻是中国大陆架唯一保存最完好的珊瑚自然生长区。本文从徐闻珊瑚保护区中采集3种石珊瑚,通过采用两种培养基分离珊瑚上共附生真菌,结合形态学和分子生物学方法进行鉴定,比较不同珊瑚上海洋真菌的分布和种属特征,采用琼脂扩散法对珊瑚共附生真菌的抗菌活性进行初步筛选。 从3种珊瑚上共分离到54株真菌,其中普哥滨珊瑚上分离到23株,扁缩滨珊瑚上分离到21株,牡丹珊瑚上分离到10株。青霉属Penicillium sp.、曲霉属 Aspergillussp.数量最多,在3个样品上均有分布,分别占菌株总数的18.52%和29.63%。从各样品珊瑚共附生真菌的分布看,滨珊瑚上青霉属和曲霉属为优势种属,牡丹珊瑚曲霉属和肉座菌属为优势种属。 结合ITS-rDNA基因序列的系统发育分析对珊瑚共附生可培养真菌多样性进行研究,将54株真菌的ITS-rDNA序列,与NCBI数据库GenBank中的序列进行相似性比较并构建系统发育树。结果表明,53株真菌分属于15个属,青霉属Penicillium sp.、曲霉属 Aspergillus sp.为优势菌属,另外还有少量Gibberella sp.、Tritirachium sp.、Hypocreaceae sp.、Basidiomycete sp.、Cochliobolus sp.、Didymellaceae sp.、Eutypella sp.、Lentinus squarrosulus、Nectria ipomoeae、Rigidoporus vinctus。另有编号C1-23的菌株相似率仅为90%,可能是一株新种。滨珊瑚多样性指数较高,菌株数量和种类较丰富,但普哥滨珊瑚上菌株在个别种属上集中,不及扁缩滨珊瑚的菌株分布均匀,牡丹珊瑚上菌株数量及种类均不及滨珊瑚,但种属的个体数量接近,均匀度也较好。 经初步提取浓缩,将54株菌的发酵粗提取物进行抗菌实验和最小抑菌浓度实验。经过初筛有13株珊瑚真菌至少对一种指示菌表现出抗性,占菌株总数的24.07%,6株活性真菌来源于1号样品,4株来源于2号,3株来源于3号样品。13株菌分属于6个属,其中曲霉属和赤霉属各4株,数量最多,共占菌株总数的14.81%,2株为Hypocreaceae sp.,还有顶枝孢属、白色念珠菌和射脉菌属各1株。选择这13株菌经过两种培养基发酵,用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇浸提的粗提物进行抑菌活性实验,发现乙酸乙酯和正丁醇粗提物抑菌活性较其他有机试剂提取活性好,C1-2,C1-10,C1-15经两种培养基发酵后的粗提物都具有良好的抑菌活性,针对某些指示菌的抑菌能力强。选择6株抑菌能力较强的菌株进行最小抑菌浓度的测试。珊瑚共生真菌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌作用最强,曲霉属和顶枝孢属真菌的抑菌活性较好,但是同属的菌株间抑菌能力不同。 研究结果表明,石珊瑚上存在大量海洋真菌,种类丰富,而不同的珊瑚上真菌种群不同,而滨珊瑚种群多样性丰富,具有开发新种的潜力,同时一些菌株的代谢产物具有抑菌活性,尤其对革兰氏阴性菌活性较好,值得进一步研究。