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目的：目前，全球哮喘患者约3亿人，中国哮喘患者约3000万。哮喘作为一种与遗传及环境因素密切相关的疾病，已从不同层面严重影响了患者的身心健康。颗粒蛋白前体（Progranulin, PGRN）是一种多效应的生长因子，广泛表达于多种组织及细胞中，且已被报道在多种疾病的炎症和免疫调节过程中发挥重要作用。然而，PGRN在哮喘中的具体作用及机制尚不清。因此，本实验的目的是探究PGRN在哮喘中的具体作用及机制。
方法：分别通过腹腔注射和雾化的方式用鸡卵清蛋白（OVA）处理小鼠以构建哮喘模型，经小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞总数计数及分类计数、ELISA方法检测相关细胞因子表达、肺部切片染色观察小鼠肺组织病理学改变等验证小鼠哮喘模型是否建立成功。经RT-PCR技术及ELISA方法检测肺组织、BALF和血清中PGRN水平。采用IL-6基因敲除鼠（IL-6 ko）构建哮喘模型，探讨哮喘小鼠体内IL-6对PGRN表达的影响。培养人呼吸道上皮细胞，给予人IL-13蛋白刺激以模拟体外哮喘炎症模型，检测在此模型中PGRN对哮喘相关指标（IL-6、RhoA、 Muc5ac、CCL-11、 CCL-24、 CCL-26）的影响，探索PGRN对哮喘的作用；经蛋白质免疫印记法（WB）筛选PGRN在哮喘中发挥作用的相关信号通路。
结果：成功构建了OVA诱导的小鼠哮喘模型。与对照组小鼠相比，哮喘小鼠肺组织PGRN mRNA水平明显降低，BALF和血清中PGRN蛋白水平也降低。较野生哮喘小鼠相比，IL-6 ko小鼠哮喘模型中BALF炎症细胞总数降低，中性粒细胞数降低，PGRN mRNA无明显变化， PGRN蛋白水平增高，BALF和血清中IFN-γ升高。经肺组织病理切片染色发现，较野生哮喘小鼠相比，缺陷哮喘小鼠肺部病理损伤也显著减轻。在体外实验中，我们发现经IL-13刺激后的人呼吸道上皮细胞PGRN的mRNA和蛋白水平均较对照组降低，哮喘相关指标（IL-6、RhoA、 Muc5ac、CCL-11、 CCL-24、 CCL-26）均增高。与单独IL-13刺激组相比，PGRN和IL-13共同刺激组嗜酸性粒细胞趋化因子及IL-6降低。Western blot结果表明PGRN可抑制p38、NF-κB的磷酸化。
结论：PGRN蛋白在哮喘体内外模型中均低于正常对照，PGRN降低的原因一方面是PGRN产生减少，另一方面可能是由于中性粒细胞相关酶对其降解所致。PGRN在哮喘体外模型中降低了嗜酸性粒细胞趋化因子和IL-6的表达，且可抑制p38、NF-κB的磷酸化。
方法：分别通过腹腔注射和雾化的方式用鸡卵清蛋白（OVA）处理小鼠以构建哮喘模型，经小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞总数计数及分类计数、ELISA方法检测相关细胞因子表达、肺部切片染色观察小鼠肺组织病理学改变等验证小鼠哮喘模型是否建立成功。经RT-PCR技术及ELISA方法检测肺组织、BALF和血清中PGRN水平。采用IL-6基因敲除鼠（IL-6 ko）构建哮喘模型，探讨哮喘小鼠体内IL-6对PGRN表达的影响。培养人呼吸道上皮细胞，给予人IL-13蛋白刺激以模拟体外哮喘炎症模型，检测在此模型中PGRN对哮喘相关指标（IL-6、RhoA、 Muc5ac、CCL-11、 CCL-24、 CCL-26）的影响，探索PGRN对哮喘的作用；经蛋白质免疫印记法（WB）筛选PGRN在哮喘中发挥作用的相关信号通路。
结果：成功构建了OVA诱导的小鼠哮喘模型。与对照组小鼠相比，哮喘小鼠肺组织PGRN mRNA水平明显降低，BALF和血清中PGRN蛋白水平也降低。较野生哮喘小鼠相比，IL-6 ko小鼠哮喘模型中BALF炎症细胞总数降低，中性粒细胞数降低，PGRN mRNA无明显变化， PGRN蛋白水平增高，BALF和血清中IFN-γ升高。经肺组织病理切片染色发现，较野生哮喘小鼠相比，缺陷哮喘小鼠肺部病理损伤也显著减轻。在体外实验中，我们发现经IL-13刺激后的人呼吸道上皮细胞PGRN的mRNA和蛋白水平均较对照组降低，哮喘相关指标（IL-6、RhoA、 Muc5ac、CCL-11、 CCL-24、 CCL-26）均增高。与单独IL-13刺激组相比，PGRN和IL-13共同刺激组嗜酸性粒细胞趋化因子及IL-6降低。Western blot结果表明PGRN可抑制p38、NF-κB的磷酸化。
结论：PGRN蛋白在哮喘体内外模型中均低于正常对照，PGRN降低的原因一方面是PGRN产生减少，另一方面可能是由于中性粒细胞相关酶对其降解所致。PGRN在哮喘体外模型中降低了嗜酸性粒细胞趋化因子和IL-6的表达，且可抑制p38、NF-κB的磷酸化。