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目的:通过体内外实验,研究黄芩素对缺氧诱导的胃癌细胞耐药的逆转作用,并研究相关机制。方法:1、细胞实验:通过CCK8试剂检测细胞活力,分别用不同浓度的黄芩素和5-FU对常氧和缺氧条件的SGC-7901细胞进行干预,选出适宜浓度的黄芩素与5-FU联合作用,验证缺氧诱导的SGC-7901细胞的对5-FU药物的耐药性和研究黄芩素对耐药的逆转作用。通过流式细胞仪和AnnexinV-FITC/PI试剂检测,选用黄芩素和5-FU分别干预常氧、缺氧的SGC-7901细胞,验证黄芩素逆转耐药机制与细胞凋亡的相关性。采用RT-PCR和Western Blot检测黄芩素对P53、Bcl-2、Bax和HIF-1α在mRNA和蛋白水平表达的影响,验证黄芩素对调控凋亡相关分子和HIF-1α缺氧诱导蛋白HIF-1a之间的关系,以期推测相关通路和机制。2、动物实验:在体外BABL/c裸鼠皮下接种SGC-7901细胞建立移植瘤模型,成瘤后按照瘤体大小分成四组,分别用生理盐水、黄芩素(20㎎/㎏)、5-FU(20㎎/㎏)和黄芩素(20㎎/㎏)+5-FU(20㎎/㎏)二者联合进行干预,通过监测裸鼠体重、瘤体体积和重量评价黄芩素对SGC-790细胞移植瘤生长的影响研究黄芩素对体外移植瘤模型的作用。结果:1、(1)在缺氧条件下SGC-7901细胞经5-FU干预48h后IC50显著大于常氧条件,耐药指数(RI)>4.84(RI>1.5即认为对药物耐药);黄芩素干预后二者的IC50无明显差异且耐药指数(RI)<1.5;(2)黄芩素与5-FU联合作用能显著降低缺氧条件下SGC-7901细胞的耐药指数(RI),联合用药组5FU+Bai(10uM)、5FU+Bai(20uM)两组的逆转倍数(RE)分别为>2.71和2.38(RE>1.5则可认为有逆转作用);(3)小剂量黄芩素(10μM-20μM)与5-FU联合使用,使用Annxin V-FITC/PI试剂双染后通过流式细胞仪检测提示有促进肿瘤细胞凋亡的能力;(4)通过RT-PCR和Western Blot法检测,提示黄芩素能显著降低缺氧细胞的HIF-1α表达,且能够上调促凋亡蛋白P53、BAX的表达,下调抗凋亡蛋白BCL-2的表达。2、动物实验:通过监测移植瘤体重量及体积提示5-FU单药组及联合用药组可抑制移植瘤增长,而黄芩素单药组对移植瘤生长无明显作用。结论:证实了黄芩素的干预能逆转胃癌细胞SGC-7901在缺氧环境下对5-FU耐药性,具有抑制细胞增殖,促进细胞凋亡的作用,其机制可能通过影响缺氧诱导因子HIF-1α和凋亡相关蛋白P53、BAX、BCL-2的表达;黄芩素对体内SGC-7901胃癌细胞移植瘤的生长无明显影响。