论文部分内容阅读
目的：肾间质纤维化和肾小球硬化是所有终末期肾病的共同病理特征，二者相互促进，肾间质纤维化的程度较肾小球硬化的程度更能指示肾功能损坏的程度。转化生长因子β1(TGF-β1)高表达是肾小球硬化和小管间质纤维化的重要致病因素。近年发现Smads蛋白是TGF-β家族信号从受体到核的细胞内转导分子，目前共发现8类Smads蛋白为Smad1～8。其中Smad2～Smad4、Smad6、Smad7参与TGF-β1的信号转导，TGF-β1配体与其受体TβRⅡ结合，激活TβRⅠ受体的丝氨酸/苏氨酸激酶，Smad2、3蛋白被磷酸化，活化的Smad2、3与Smad4形成活性的转录复合物进入核内，调节相应的靶基因转录，而Smad6、7阻碍Smad2、3活化，Smads蛋白的结构和功能特点决定了该家族信号转导的多样性，TGF-β1/Smads的表达极可能决定纤维化的程度。血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)对肾脏的保护作用已得到了人们的公认，它可使肾血管阻力减轻，肾血流和肾小球滤过率增加，下调TGF-β1的表达。据报道，缬沙坦可抑制肝纤维化大鼠TGF-β1、Smad3的表达，并促进Smad7的表达，抑制肝纤维化。目前尚未检索到缬沙坦对肾间质纤维化模型中TGF-β1/Smads转到通路的影响，本实验以大鼠单侧输尿管结扎术(UUO)建立肾间质纤维化模型，以缬沙坦灌胃，观察肾脏病理、免疫组织化学检测TGF-β1、Smad2、Smad7蛋白的表达情况。探讨肾间质纤维化中TGF-β1、Smads蛋白的表达及ARB对其影响，为临床治疗肾间质纤维化提供理论指导。
方法：选择健康雄性SD大鼠60只，体重180g～220g为研究对象(由河北医科大学实验动物中心提供)。随机选取20只作为假手术组(A组，n=20只)，只游离输尿管但不结扎。3％水合氯醛(0.1ml/kg体重)腹腔麻醉其余40只，行左侧输尿管结扎术，建立单侧输尿管梗阻模型。术后随机分成模型组(B组，n=20只)和代文(北京诺华制药有限公司)治疗组(C组，n=20只)，三组均于术前一天开始灌胃，A组和B组每只每日给予自来水2ml，上午8：30～9：00灌胃，每日一次；C组给予代文(10mg/kg，溶于水中，治成2ml混悬液)灌胃，每日一次，时间同前两组，实验期间自由饮食水。术后第3天、7天、14天分三批采取标本，颈椎离断处死后立即取出大鼠左肾组织，分别用于光镜、苏木素伊红(HE)、Masson染色观察病理形态，免疫组化染色检测TGF-β1、Smad2、Smad7，结果应用图像分析系统进行半定量分析。
结论：TGF-β1信号通路参与了梗阻性肾病肾小管间质损伤的进程，受体激动的R-Smads蛋白的表达上调，抗Smads蛋白(anti-Smads)不能相应上调可能是该模型致肾小管间质纤维化的重要原因，缬沙坦可通过调节TGF-β1/Smads信号通路的表达而减少细胞外基质(ECM)的沉积，减轻肾间质纤维化，延缓肾脏损害，保护肾功能。