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实验一急性肺损伤大鼠肺泡上皮紧密连接的时相性改变目的观察急性肺损伤(ALI)后不同时间对肺泡上皮紧密连接(TJ)完整性的破坏及其对肺泡上皮通透性改变的影响。方法内毒素(LPS)静脉注射复制大鼠ALI模型。25只清洁级SD大鼠随机分成5组:对照组,LPS组,LPS+机械通气2小时(LV2h)组,LPS+机械通气4小时(LV4h)组和LPS+机械通气6小时(LV6h)组。动物处死前2h静脉注射异硫氰酸荧光素标记的白蛋白(FITC-Albumin),处死后肺泡灌洗,根据肺泡和血清中标记白蛋白的比值,即A肺泡/A血清测定肺泡上皮通透性,取肺组织作病理检查,光镜下行ALI半定量评分;测定肺组织湿/干重比(W/D)反映肺水肿程度;免疫荧光共聚焦观察肺组织TJ的形态学改变以及TJ蛋白Occludin的表达;Western Blot测定Occludin的表达。结果(1)对照组ALI评分2.60±0.25,LPS组(8.00±0.21)显著增高(q=25.74,P < 0.05);与LV2h组(8.02±0.48)相比,LV4h组(7.20±0.40)和LV6h组(7.06±0.23)显著降低(q=3.91和q=4.58,P < 0.05)。(2)对照组W/D 1.97±0.75,LPS组(5.81±0.68)显著下降(q=10.12,P < 0.05);与LV2h组相(4.20±0.53)比,LV4h组(3.68±0.65)和LV6h组(3.61±0.28)差异无显著性(P > 0.05)。(3)对照组A肺泡/A血清1.09±0.05,LPS组(1.99±0.23)显著增高(q=3.33, P < 0.05);与LV2h组(3.58±0.47)相比,LV4h组(1.87±0.57)和LV6h组(2.04±0.57)的显著降低(q=6.31和q=5.67,P < 0.05)。(4)对照组动物肺组织清晰可见TJ沿肺泡上皮连续排列,荧光密度强,LPS干预各组TJ排列不规则,断断续续,呈弥散分布,且荧光密度明显下降,LV2h组犹为明显。(5)免疫荧光测定对照组的Occludin的表达69.2±9.9,LPS组(45.4±6.3)显著降低(q=6.39,P < 0.05);与LV2h组(18.0±3.3)相比,LV4h组(30.8±4.2)和LV6h组(29.2±2.6)显著增加(q=3.44和q=3.01,P < 0.05)。Western blot测定对照组Occludin的表达0.90±0.42,LPS组(0.69±0.57)显著下降(q=4.29,P < 0.05);与LV2h组(0.27±0.69)相比,LV4h组(0.44±0.83)和LV6h组(0.43±0.12)则显著升高(q=3.44和