粘虫嗅觉相关基因的表达模式及MsepOR13功能研究

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangfei0960
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
嗅觉在昆虫种群繁殖和生存中起着至关重要的作用,因此嗅觉相关基因的鉴定对丰富和完善昆虫化学通讯系统的研究具有重要意义。粘虫Mythmna separata是我国重要的农业害虫,可取食16科104种植物。本研究采用RNA-seq技术对粘虫雌雄蛾触角转录组进行测序,分别获得71.71、66.42、63.37、60.56、57.64和67.21 M个Clean Reads,每个数据量都大于8 G,Q30值大于90%。将同一组织的3次生物重复合并组装,分别获得326,538(平均长度608 bp)转录本和132,454(平均长度1021 bp)个Unigenes,其中200-500 bp长度的基因最多。将所获得的基因在7大数据库中进行比对,其中在NR数据库中注释到的基因数最多,占总基因数的28.40%,其次为GO数据库(24.03%)和Pfam数据库(23.9%)。GO注释之后,发现在分子功能中,具有结合(17487/54.92%)和催化活性(12190/38.29%)的基因数量最多,这与昆虫触角的功能特性是一致的。进一步对上述触角转录组数据注释和分析,共鉴定出57个ORs基因(包括5个PRs基因、1个Orco基因)、22个IRs基因、28个GRs基因、21个OBPs基因(包括2个GOBPs、3个PBPs基因、4个plus-C OBPs基因、1个minus-C OBP基因)和19个CSPs基因。通过实时荧光定量PCR法对5个MsepPRs基因的时空表达谱进行分析,发现这5个PRs基因在雌雄成虫触角内特异表达,其中MsepPR1、MsepPR2、MsepPR4和MsepPR5在雌虫触角中的表达量显著高于雄虫,而MsepPR3在雄虫触角中的表达量显著高于雌虫。雄虫MsepPRs基因在交配前后表达量差异显著,其中MsepPR1、MsepPR3和MsepPR5在交配前的表达量明显高于交配后,而MsepPR2和MsepPR4在交配后的表达量明显高于交配前。通过实时荧光定量PCR法对粘虫OBPs和CSPs的组织表达谱分析结果表明,共有13个OBPs(MsepGOBP1、MsepGOBP2、MsepPBP1、MsepPBP2、MsepOBP1、MsepOBP3、MsepOBP6、MsepOBP7、MsepOBP8、MsepOBP10、MsepOBP11、MsepOBP14和MsepOBP15)基因在雌雄成虫触角中特异性表达;其中8个OBPs基因(MsepGOBP1、MsepPBP2、MsepOBP1、MsepOBP3、MsepOBP10、MsepOBP11、MsepOBP14和MsepOBP15)在雌虫触角中表达量明显高于雄虫。4个OBPs基因(MsepOBP2、MsepOBP4、MsepOBP9和MsepOBP13)在精巢中大量表达,且其表达水平与雌雄虫触角中表达量相当或者显著升高。MsepOBP12表达谱较广,在不同组织中均有表达。MsepOBP17在雌蛾腹部表达量明显高于其它组织。3个CSPs基因(MsepCSP1、MsepCSP10和MsepCSP16)在雌雄虫触角中特异性表达,其中MsepCSP10在雌虫触角中的表达量明显高于雄虫,MsepCSP16的表达情况恰好同MsepCSP10相反,在雄虫触角中多于雌虫。3个MsepCSPs基因(MsepCSP4、MsepCSP8和MsepCSP9)在精巢或卵巢中高度表达,12个MsepCSPs基因(MsepCSP2、Msep3、Msep4、Msep5、Msep6、Msep7、Msep11、Msep12、Msep13、Msep14、Msep15和Msep18)在翅上显著高表达。参考转录组测序结果并结合RT-PCR法,获得了粘虫的MsepOR13基因。实时荧光定量法证实,MsepOR13主要表达在雌雄虫的触角中。进一步通过爪蟾卵母细胞记录/双电极电压钳法检测MsepOR13对67种植物挥发物的调谐谱,发现MsepOR13对其中32种化合物有反应,以丁香酚的反应最强。进一步的浓度梯度实验表明,低至10-9M的丁香酚可引起MsepOR13产生反应。根据MsepOR13的这种高度敏感性推测,MsepOR13在昆虫的嗅觉系统中可能具有重要作用。本研究通过对粘虫触角转录组测序,获得了大量与粘虫嗅觉相关的基因,并对其中部分基因的表达和功能进行了初步研究,为深入揭示粘虫的化学通讯系统机制的研究奠定了一定基础,并为未来我们利用化学通讯技术防治粘虫提供一定的理论依据。
其他文献
目的 观察不稳定型心绞痛患者 (UA)入院后血清肌钙蛋白 I(c Tn I)和肌红蛋白 (Mb)变化 ,探讨其与心电图(ECG)改变、心绞痛分级、冠状动脉病变的关系及对心脏事件的近期、远
将 2 1只处于间情期的雌兔 ,随机分成试验组和对照组 ,试验组每只肌注 1 m L( 1 5μg)促性腺激素释放激素 ,然后分 7个阶段取材观察卵巢和子宫的形态学变化。结果表明 ,注射
近期,有关“专车”、“专车”司机、出租车的新闻频上头条,社会各方都在期待这一关乎百姓出行的出租车行业改革方案出台。$$ 事实上,一些地方出租车改革的序幕已悄然拉开。今年
报纸
以知识量作为作业难度表征的重要指标;在讨论信息量、教学时间与知识量关系的基础上,根据BROOKES信息基本方程,建立了社会标准教学时间与知识量的映射关系;根据知识表达系统提出
本文利用四川省蒲江、都江堰及广元320户的猕猴桃种植农户调研数据,采用Logit模型分析了农户对蜜蜂授粉技术的采用意愿及影响因素。研究表明,农户年龄、性别、学历、是否有外
由于农田退水和生活污水的大量排放,加上现代集约农业大量化肥的理施用,大量的营养元素,特别是氮素随水移动进入到地下水、江河湖泊水体中,造成水体富营养化。人工湿地是20世
开展深入的防灾教育能切实提升灾害应对能力,有效较少灾害带来的影响。防灾教育包含灾害知识教育、防灾减灾技能教育、灾害文化养成教育。开展防灾教育,应加强政策法规的制定
长沙歌厅文化在经过20多年的发展后形成了娱乐互动、雅俗共赏、内容健康的品牌特色,其发展经验主要有:注重歌厅品牌打造,以市场为导向的运作模式,高度敬业与技艺精湛的人才。
基于正在发展完善中的中文编程软件E4a,开发了一款大学物理公式手册移动APP,该软件是一个基于Android系统的应用程序,可以运行在android 2.1以上任何版本的操作系统上,客户端
近年来,随着计算机软硬件的高速发展,3Dbody解剖APP的应用越来越普通。本文采用问卷调查表的形式对3Dbody解剖APP结合手术演示在骨科手术教学中的应用效果进行研究,调查研究