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目的:探讨反应性氧代谢物(ROM)对NK细胞抗瘤活性的影响及硫普罗宁逆转ROM抑制NK细胞抗K562细胞活性的免疫佐剂作用。方法:采用IL-2及PHA活化单核(MO)细胞,使MO细胞的ROM产量增加,观察NK细胞活性、K562细胞抑制率(KIR)的相应变化,然后在不同比例的MO+NK +K562细胞培养体系中加入不同浓度的硫普罗宁,定期检测ROM产量及KIR、IL-6、TNF-α产量(每种检测均做3个复孔),同时应用不同浓度的还原型谷胱甘肽(GSH)、二氢氯组胺(DHT)作为阳性对照。结果:在K562细胞、NK细胞混合培养体系中,加入IL-2/PHA后,当E/T=10/1时,ROM的产量从33.17±25.02U/ml增至223.59±59.41U/ml(P<0.05),KIR从65.56%升至85.89%(P<0.05);当按E/MO=10/2、10/5、10/10三种比例加入MO细胞后,ROM产量随着MO细胞数量的增加而增加(ROM产量分别为389.79±43.83U/ml,456.74±42.77U/ml,601.42±21.92U/ml),而KIR则相反(KIR分别为82.36%, 81.36%, 48.09%);而在K562+NK+MO+IL-2/PHA混合培养体系中加入硫普罗宁、DHT或GSH后,当E/MO=10/2时,ROM产量从389.79±43.83U/ml分别降至-1.20±60.70U/ml,50.21±22.4U/ml和-3.59±9.49U/ml(P<0.05),KIR则从82.53%分别升至96.09%,94.64%和96.40%(P<0.05)。随着硫普罗宁、GSH、DHT浓度的增加,ROM产量逐渐减少。ROM产量与KIR呈负相关(r=-0.598)。当E/MO为10/5或10/10时,各浓度硫普罗宁及高浓度的GSH、DHT可使ROM产量减少(P<0.05),但KIR提高<WP=5>不明显(P>0.05)。硫普罗宁在提高KIR的效应方面与DHT相似(P>0.05),而在清除ROM方面,硫普罗宁较二氢氯组胺为优(P<0.05)。结论:1.MO细胞是ROM产生的最主要来源,而K562细胞、NK细胞也产生一定量的ROM;2. MO细胞产生ROM可使NK细胞的抗瘤(抗K562)活性下降;3. 硫普罗宁在MO细胞比例较低时,可通过清除ROM保护NK细胞,从而提高NK细胞的抑瘤活性,同时对ROM的清除表现出一定的量效关系。而在MO细胞比例较高时,这种保护作用下降;4. 硫普罗宁在逆转ROM方面优于二氢氯组胺,在提高NK细胞对K562细胞的抑制率方面效应强度与二氢氯组胺相似,但毒副作用较低,有望替代二氢氯组胺作为免疫佐剂用于白血病的过继性免疫治疗中。