林可霉素菌种选育及发酵培养基的优化

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本研究以林可霉素生产菌林可链霉菌(Streptomyces linloinensis)为出发菌株,采用紫外线(UV)、甲基磺酸乙酯(EMS)进行复合诱变处理,以终产物林可霉素为选择压力进行菌株筛选,结果表明,诱变得到的林可霉素抗性突变株L13-6-3发酵水平达到4108±87u/mL,较出发菌株提高13.5%。由于诱变菌的基因突变,原培养基配方可能不再适合突变菌的生长发酵,针对主要影响林可霉素发酵水平的葡萄糖、黄豆饼粉、玉米浆和硫酸铵四个因素进行L9(34)的正交试验,得到优化培养基,其组成成分为葡萄糖10g/L、黄豆饼粉2.5g/L,、(NH42SO40.6g/L、玉米浆0.2g/L。诱变菌株采用优化后的培养基进行林可霉素发酵,发酵水平达到4321±83 u/mL,较使用优化前培养基的发酵水平提高8.3%。将经诱变筛选得到的突变株L13-6-3和出发菌株L10-18在50 L罐上进行发酵小试实验,验证诱变菌的生产能力。对林可霉素发酵过程进行调控。林可霉素发酵培养过程中适当的补料有助于延缓菌体衰老,添加葡萄糖、黄豆饼粉、(NH42SO4为林可霉素发酵提供基础营养物质,补料可以为发酵提供其他必需的营养物质。最终产量较出发菌株提高16.1%。通过测定发酵过程中的各项指标发现突变菌株较出发菌株的生长代谢及合成代谢更加旺盛。以上结果为林可霉素工业化生产奠定了基础。
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