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真菌毒素一直制约着全球农作物的发展,对人体危害极大,开发一种快速、灵敏、高效、节省成本的检测方法显得尤为重要。表面增强拉曼光谱技术和光子晶体相结合,可以发挥表面增强拉曼光谱灵敏度高、前处理简单、稳定性强的特点,将其用于真菌毒素的检测,可以实现检测高灵敏度、高准确性。本文制备出大小均一的光子晶体微球和结构稳定的拉曼标签,采用免疫竞争反应,优化AFB1-Ab、AFB1-BSA浓度,建立AFB1的检测方法。最终确定AFB1-Ab的浓度为60 μg/mL、AFBi-BSA的浓度为20 μg/mL,AFB1线性检测范围为10-3-]0 ng/mL,线性方程为 y=-7816.00746logx+198.80679,R2=0.998,检测限为 7.779 pg/mL,采用AFG1毒素,对AFB1进行特异性分析,结果表明两者没有交叉反应,此方法有良好的特异性。在谷物样品的加标回收率中,本方法对比ELISA方法,结果表明两者回收率基本一致,说明本文所建立的方法可以用来检测谷物中的真菌毒素。将本法应用到OTA、ZEN的检测中,对OTA和ZEN的抗原抗体浓度进行优化。最终确定 OTA-BSA、OTA-Ab、ZEN-BSA、ZEN-Ab 浓度分别为 80 μg/mL,40 μg/mL,40μg/mL,40 μg/mL,并根据优化条件分别绘制了两种真菌毒素的标准曲线:OTA线性检测范围为0.01-1 ng/mL,线性方程为y=-]0112.58051ogx+39217.39061,R2=0.998,检测限为 18 pg/mL,ZEN 线性检测范围为 0.01-10 ng/mL,线性方程为y=-10198.116logx+19882.29574,R2=0.999,检测限为0.503 pg/mL。最后建立了同时检测多元真菌毒素的方法。结果表明AFB1线性范围在10-3-0.1 ng/mL 之间,线性方程为 y=-18210.558361ogx+13100.95808,R2=0.987,检测限为34.755 pg/mL;OTA线性检测范围在0.01-10 ng/mL之间,线性方程为y=-10455.753781ogx+23448.94951,R2=0.995,检测限为47.089 pg/mL;ZEN线性检测范围在 10-3-0.1 ng/mL 之间,线性方程为 y=-5285.633561ogx+31937.25143,R2=0.991,检测限为0.042 pg/mL。对该检测体系进行特异性分析,结果表明特异性良好。之后分别用本法和ELISA测定三种混合毒素在实际样品的回收率,结果表明两种方法测得的回收率结果基本一致,表明本文所建立的多元真菌毒素检测的可行的。