【摘 要】
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首先从人的胎肝组织中克隆了人的α半乳糖苷酶基因,构建了其真核表达载体.同时构建了α半乳糖苷酶和α1,2岩藻糖转移酶双基因表达载体.将这两个载体分别导入到猪的血管内皮细
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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首先从人的胎肝组织中克隆了人的α半乳糖苷酶基因,构建了其真核表达载体.同时构建了α半乳糖苷酶和α1,2岩藻糖转移酶双基因表达载体.将这两个载体分别导入到猪的血管内皮细胞系PEDSV.15中,获得了稳定表达的细胞株.结果显示α半乳糖苷酶基因的转导可以将猪血管内皮细胞表面的半乳糖α13半乳糖抗原表达量降低78﹪,而α1,2岩灌糖转移酶基因也可以清除50﹪的细胞表面异种抗原,但都不能达到完全清除的目的.当α半乳糖苷酶和α1,2岩藻糖转移酶双基因在内皮细胞内共表达时,则可以基本清除半乳糖α1,3半乳糖抗原.补体杀伤实验也表明抗原的减少可以不被杀伤.这些结果表明α半乳糖苷酶基因和α1,2岩藻糖转移酶基因可以有效地清除血管内皮细胞表面的半乳糖α1,3半乳糖抗原,即清除发生HAR的抗原基础,为下一步进行动物实验,探讨克服异种移植HAR的研究提供了技术途径.
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