Netrin-DSCAM下游信号转导通路的研究

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sysyssy
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Netrin-1是一个重要的神经导向因子。在神经发育中,它的作用是诱导轴突生长和转向。DSCAM(Down syndrome cell adhesion molecule,唐氏综合症细胞粘附分子)是netrin-1的受体之一,介导netrin-1对轴突的吸引作用。但是,netrin-DSCAM下游的信号转导通路仍然未知。   第一部分工作中,结合酵母双杂交系统的筛选结果与文献报道,我们选择AMPK(AMP-activated protein kinase,AMP蛋白激酶)分子作为研究对象,运用免疫共沉淀、磷酸化水平检测等生化手段和轴突生长的功能学实验方法,研究了AMPK在netrin-DSCAM信号通路中的作用。研究结果显示,AMPK通过其γ亚基与DSCAM相互作用,而它与netrin-1的另一个受体DCC(Deleted in colorectal cancer,结直肠癌缺失蛋白)没有相互作用。Netrin-1的刺激可以显著提高小鼠皮层神经元中AMPK的磷酸化水平。在小鼠皮层神经元中,表达显性抑制的AMPK(Dominant-negative AMPK)突变体或者使用AMPK特异性的化学抑制剂CompoundC都会显著抑制netrin-1所诱导的轴突生长。这些结果证明,AMPK通过与DSCAM相互作用参与调控netrin-1诱导的轴突生长。我们的研究确认AMPK是netrin-DSCAM通路中的一个信号分子,为netrin-DSCAM下游信号通路的深入研究提供了新思路和实验依据。   第二部分工作中,根据文献报道,我们选择DISC1(Disrupted in schizophrenia 1,精神分裂症断裂基因1)分子作为研究对象,运用免疫共沉淀手段和轴突生长的功能学实验方法,研究了DISC1在netrin-DSCAM信号通路中的作用。结果显示,生化水平上DISC1与DSCAM相互结合。小鼠皮层神经元中,下调DISC1的表达显著增加轴突生长的基础水平,此时netrin-1对轴突生长的促进作用消失。结合相关文献报道,我们的研究结果提示,DISC1可能参与netrin-DSCAM的信号转导通路,调控神经元轴突生长。这一研究为netrin-DSCAM信号通路以及DISC1在神经发育中作用研究提供了新线索。
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