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研究背景及目的:随着供肺保存、术后抗排异治疗、移植监护等多学科综合技术的发展,肺移植术后生存率已经逐步提高。导致肺移植术后预后不良的主要并发症包括:移植肺缺血再灌注性损伤、感染、多器官功能不全、急性排异反应和以闭塞性细支气管炎(bronchiolitisobliterans,BO)为特征表现的慢性排异反应。如何有效保护供肺气道上皮细胞,找到慢性排异的关键启动/调控机制,并且如何有效干预其病变进程发展是目前诱导肺移植受者术后长期免疫耐受、延长移植物功能的重点。研究方法:本研究主要利用气道上皮细胞和树突状细胞共培养模型,首先观察长链非编码RNAMalat1在气道上皮细胞及树突细胞共培养体系中表达变化,随后抑制Malat1表达,研究Malat1抑制后的气道上皮细胞对树突状细胞的作用。利用细胞转染,流式细胞检测,酶联免疫分析,MTT细胞增殖,PCR,蛋白等实验技术,观察Malat1抑制后的气道上皮细胞对树突状细胞免疫表型,炎症因子分泌,增殖及凋亡的影响。机制的研究中我们锁定miR-146a以及STAT3/JAK2信号通路,进一步深入探索Malat1在气道上皮细胞及树突状细胞交互作用中潜在可能的调控机理。结果:构建气道上皮细胞和树突状细胞共培养模型,观察到在此过程中,Malat1表达显著上升趋势。在功能研究实验中,抑制Malat1后的气道上皮细胞作用与树突细胞,能够显著促进树突细胞表型分子CD80,CD86,MHCⅡ在mRNA和蛋白水平的表达,同时气道上皮细胞抑制Malat1后能促进树突细胞炎症因子的分泌,包括TNF-a,IL-6,INF-r的分泌,但是抑制炎症因子IL-4的表达,另一方面,抑制Malat1后的气道上皮细胞作用与树突细胞后明显抑制树突细胞凋亡标志物Annexin-V的表达,MTT细胞活力实验也表明其能在一定程度上促进细胞增殖。机制研究我们证实在共培养体系中Malat1对炎症及趋化因子表达的抑制是通过海绵吸附miR-146a而实现的,同时我们还发现Malat1及miR-146a在共培养系统中对免疫炎症的调控作用是可能是部分通过STAT3信号通路中STAT3/JAK2磷酸化起作用。结论:本研究成功揭示了 Malat1在气道上皮细胞和树突细胞共培养体系中的作用,研究证实Malat1能抑制气道上皮细胞作用后的树突细胞成熟,调控炎症因子分泌,同时促进树突细胞凋亡,抑制树突细胞增生,长链非编码RNA Malat1可能是调控肺移植免疫微环境的新靶点。