三七总皂苷促进骨髓干细胞移植治疗下肢动脉硬化闭塞症的实验研究

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目的:从实验角度探讨三七总皂苷对骨髓干细胞移植后,后肢缺血大鼠模型血管新生的促进作用,并通过测定大鼠缺血后肢多普勒血流量及血清VEGF的含量初步探讨其作用的机制。方法:将实验大鼠随机分为4个组,分别是:正常组、缺血组、干细胞移植组、干细胞移植+中药组。其中缺血组按缺血不同时间分为5组,分别为缺血4小时、3天、7天、14天、28天组。干细胞移植组分为移植14天组及移植28天组。干细胞移植+中药组分为用药14天组及用药28天组。除正常组外,各组均通过切断并结扎左后肢股动脉,建立大鼠后肢缺血模型。造模成功后,对干细胞移植组及干细胞移植+中药组进行骨髓干细胞移植(缺血后肢肌肉注射干细胞分离液)。同时各组开始给药,干细胞移植+中药组给予三七总皂苷腹腔注射,干细胞移植组注射相同比例生理盐水。分别于用药14天、28天时,用激光多普勒血流测定仪检测缺血后肢血流灌注量。大鼠腹主动脉取血,通过酶联免疫法测定其血清VEGF含量变化。结果:采用SPSS13.0进行数据处理,统计学方法为方差分析。在缺血4小时血清VEGF含量(15.83+2.173 pg/ml)与其正常组(30.79+4.888 pg/ml)有明显差异(P<0.01)。局部血流灌注量(66.91+1.909 pu)亦显著下降,并持续降低至缺血第7天。缺血7-28天时,随着VEGF含量逐渐回升,血流灌注量也明显增加,但仍低于正常水平(P<0.01)。干细胞移植的两组血清VEGF含量及局部血流灌注量均明显高于单纯缺血组(P<0.01)。干细胞移植+中药两组血清VEGF含量及局部血流灌注量均明显高于单纯缺血组(P<0.01)及干细胞移植两组( P< 0.01)。干细胞移植+中药28天组的血流灌注量(77.75+3.009 pu)甚至显著高于正常组(P<0.01)。结论:血清VEGF含量是组织缺血的敏感指标,在缺血前期(4小时~7天)下降,至缺血后期(14天~28天)缓慢增加。骨髓干细胞移植可通过提高后肢缺血大鼠血清中的VEGF含量,促进缺血肌肉组织的血管新生。三七总皂苷可显著上调血清VEGF含量,并增加缺血组织血流灌注量,这可能是其促进骨髓干细胞移植治疗下肢动脉硬化闭塞症的机制之一。
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