芦笋低聚糖的分离鉴定及其功能研究

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芦笋(Asparagus officinalis Linn)是一种营养价值极为丰富的蔬菜,从中分离提取低聚糖是芦笋深加工发展的方向之一。本论文研究了芦笋低聚糖的提取工艺和分离纯化方法,并对其进行了初步的鉴定和功能研究,以期为进一步开发芦笋的食用和药用价值提供科学依据。以单因素试验为基础进行四因素三水平正交试验,热水浸提法提取芦笋粗糖的最佳工艺条件为:浸提温度80℃,浸提时间90min,料液比为1:20,乙醇终浓度80%,醇沉时间8h,浸提2次。运用不同辅助方法提取芦笋低聚糖,提取率为:微波冻融>微波浸提>超声波浸提>闪式提取>热水浸提。绿芦笋和紫芦笋不同部位低聚糖含量比较显示,紫芦笋中低聚糖含量约是绿芦笋的3.5倍,两种芦笋均是芦笋皮中低聚糖的含量显著多于笋肉。分离纯化芦笋低聚糖的试验表明,木瓜蛋白酶+Sevag法清除蛋白质的效果优于各种方法单独作用。Sephadex G-25柱的最佳分离条件为:进样体积0.4mL,蠕动泵转速为2r/min,收集体积为1mL。凝胶渗透色谱法测定两种芦笋低聚糖的分子量分别为524.566和568.615,红外光谱和气相/质谱分析显示芦笋低聚糖的单糖组成为1,2,3,4,6-5-O-α-D-吡喃葡萄糖、1,2,3,4,6-5-O-吡喃半乳糖、2,3,4.5,6,-5-O-D-葡萄糖、5-O-吡喃葡萄糖和2,3,4,5,6-5-O-甘露糖,以吡喃环或呋喃环的形式存在。分别采用邻二氮菲-金属铁离子-H2O2体系和邻苯三酚法测定芦笋低聚糖清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的能力,结果显示,10mg/mL芦笋低聚糖与30mg/mL的甘露醇对羟基自由基的清除率相近,对的清除能力,芦笋低聚糖浓度为30mg/mL时超氧阴离子自由基的清除率为53.30%。体外试验发现,在GAM液体培养基中,添加芦笋低聚糖可以显著促进双歧杆菌的增长,且三剂量组之间差异达显著(P<0.05)。乳酸杆菌和乳酸链球菌在营养丰富的MRS芦笋低聚糖添加培养基和营养贫瘠的普通肉汤芦笋低聚糖添加培养基中的增殖幅度均大于对照组,统计学分析显示,前者与对照组的差异不显著(P>0.05),后者与对照组差异显著(P<0.05)。
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