支链脂肪酸(Branched-Chain Fatty Acids,BCFAs)是一类碳链骨架上带有一个或者多个支链的脂肪酸,是母乳脂中微量脂肪酸的主要成分。BCFAs也是婴幼儿出生前肠道内的重要营养物质,具有对肠道黏膜的保护作用和抑制病原菌形成生物膜的作用。早产儿肠道发育不完全,母乳源的BCFAs能为其提供重要保护。目前国内外对母乳中BCFAs的研究还很少见,特别是对早产儿母乳BCFAs的研究还是空白,对于其分布、存在形式、天然来源及功能评价的相关研究鲜有报道。所以,本文主要研究了母乳脂,特别是早产儿母乳、胎脂和胎便中BCFAs的组成规律,考察了胎龄、泌乳期、膳食和乳母状况对母乳中BCFAs含量及其位置分布的影响,对比了BCFAs在胎脂和胎便中的组成差异,并以紫色杆菌及肠道致病菌为细菌模型研究了从羊毛脂分离的BCFAs对微生物生物膜的抑制作用。主要研究内容如下:首先,以早产儿母乳为原料,采用本实验室建立起来的尿素薄层结合银离子薄层富集的方法对早产儿母乳脂进行了预处理,然后检测了其中总BCFAs组成。结果表明母乳脂中BCFAs较为复杂,通过富集分离,早产儿母乳脂肪酸中BCFAs占总脂肪酸的百分比含量达到19.42%,低于足月儿母乳中BCFAs含量(23%),BCFAs多数为常见的末端甲基,碳链长度为C12~C22。同时选用GC-MS对早产儿母乳中常见的单甲基BCFAs进行测定。结果显示母乳脂中主要的BCFAs有异(iso)-C14:0、iso-C15:0、反异(anteiso)-C15:0、iso-C16:0、iso-C17:0和anteiso-C17:0。母乳BCFAs最高为0.55%,最低为0.27%,其中,anteiso-C17:0是所有母乳中含量最丰富的BCFAs。其次,对收集得到的母乳样本的背景信息进行整理,分析了胎龄、泌乳期、膳食和乳母状况对母乳中BCFAs含量及其位置分布的影响。结果表明胎龄、泌乳期、膳食是影响母乳中BCFAs含量的主要因素。母乳BCFAs占总脂肪酸的百分比在整个泌乳阶段显著不同,其中初乳中含量最高,其次是过渡乳和成熟乳(百分比中位数分别为0.41%、0.31%和0.28%,p<0.05)。早产儿母乳BCFAs与足月儿母乳相比含量较低。偏肉食特别是反刍动物产品摄入越多的乳母,其母乳中总BCFAs的含量越高。BCFAs主要位于甘油三酯的sn-2位上(52%~65%),与棕榈酸相似。再次,用薄层板分离胎脂和胎便的脂质,采用GC-MS分析对比了胎脂和胎便中各种脂质中的脂肪酸组成,从而全面了解婴幼儿BCFAs的来源及去路情况。结果表明胎脂中含有多种脂质种类,其中胎脂总脂质中BCFAs占总脂肪酸约17.16%,碳链长度范围为C12~C26,主要BCFAs是anteiso-BCFAs和iso-BCFAs。胎脂甘油三酯中BCFAs的含量约19.8%。胎脂蜡酯中的BCFAs含量最高(约18.78%),胎脂游离脂肪酸(FFA)中BCFAs含量约为15.14%,说明BCFAs比较均匀地分布于胎脂的各种脂质种类中。在乳母妊娠期的最后一个月约有214.2 mg BCFAs通过胎脂被吞食进入其胎儿的消化道中。足月儿胎便脂肪酸中BCFAs的含量约为10.24%,估算胎便中BCFAs的总含量约为20.9mg。早产儿胎便脂肪酸中BCFAs总含量约为5.55%,低于足月儿胎便。胎儿从胎脂中吞食的BCFAs的量远远高于出生后婴儿胎便中排出的量,这表明大部分BCFAs在进入消化道时被吸收或保留在肠腔中。最后,采用GC-MS分析了羊毛脂中脂肪酸组成,发现主要是饱和脂肪酸,且近50%是BCFAs,anteiso-BCFAs和iso-BCFAs分别占22.89%、22.72%,包含了胎脂中可检测到的绝大部分种类的BCFAs。说明羊毛脂具有作为BCFAs天然来源的潜能。通过制备液相纯化分离,制得的脂肪酸产品中与胎脂和母乳中含有的BCFAs相同的组分可达到48.57%,其他脂肪酸均是可食用的常见脂肪酸。BCFAs对生物膜的形成有显著的抑制作用,BCFAs浓度在大于80μg/m L时可明显的抑制紫色杆菌紫色素的产生。研究发现BCFAs(1/2 MIC)对铜绿假单胞杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌生物膜的抑制率分别为12.96%,28.99%,36.9%,且浓度越高,抑制作用越大。