木本植物抑藻化感物质的分离、抑藻机理及应用效果研究

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化感作用是植物与藻类竞争的重要手段。本论文以广玉兰、黄杨、龙爪槐三种外来植物对铜绿微囊藻的化感作用为研究对象,采用室内培养铜绿微囊藻的方法,证明了三种木本植物对本地分离的铜绿微囊藻株系(FACHB-905)具有明显的抑制作用。通过对其中抑藻作用最为明显的广玉兰叶片提取物的筛选,成功地从中分离得到几种醇类、酮类和酯类化感物质,为筛选新的、无污染的、廉价高效的除藻剂提供了新的参考途径。具体结论如下:(1)广玉兰、龙爪槐和黄杨三种陆生植物浸提液对铜绿微囊藻的生长有明显的抑制作用,且浓度越高,抑制作用越显著。在8g/L高浓度条件下,培养7天后,三种植物的抑制率可分别达到97.75%、90.29%、96%。(2)利用乙醇溶剂萃取法从广玉兰中得到2个具有抑藻活性的组分,最高抑藻率可达96.03%和98.04%,该组分存在于正己烷和正丁醇相中;从龙爪槐中得到1个具有抑藻活性的组分,该组分存在于正己烷相中,最高抑藻率达99.89%;从黄杨中得到2个具有抑藻活性的组分,最高抑藻率分别达到94.59%和90.08%,它们分别存在于乙酸乙酯相和水相中。(3)抑制机理实验结果表明,广玉兰叶片提取物不但对铜绿微囊藻的超微结构产生了破坏,还对其生理生化各方面产生了影响。具体表现为细胞结构特别是叶绿体、线粒体等细胞器受到损伤,细胞内的物质大量渗出,细胞膜透性显著上升,超氧化物歧化酶(SOD)活性呈现先升高后降低的趋势,藻细胞可溶性蛋白的含量几乎直线下降。(4)用乙醇溶剂萃取法对广玉兰叶片中化感物质进行了提取分离,运用硅胶柱层析、凝胶过滤(Sephadex LH-20)等手段,从广玉兰叶片中分离得到了33种化合物,经GC-MS鉴定,这些化合物中主要含有正三十七醇、胆甾-3-醇、9,10-断胆甾烷-5,7,10(19)-三烯-3?25,26-三醇等醇类物质和2H-环庚三烯[b]呋喃-2-酮、6-[1-(羟甲基)乙烯基]-4,8a-乙烯基]-4,8a-二甲基-4a,5, 6,7,8,8a-六羟基-2(1H)-萘酮等酮类物质以及邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯等酯类物质。
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