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一、课题背景及目的渗出性胸腔积液在临床上以结核性和恶性胸腔积液最为多见。结核性和恶性胸腔积液治疗和预后迥然不同,故正确鉴别非常重要。结核性胸腔积液和恶性胸腔积液细胞学检查往往都是以淋巴细胞占优势的渗出性胸水,而肿瘤细胞的检出率较低,胸水直接检查和Ziehl-Neelsen染色法需要结核杆菌数在10,000/mL,因此,灵敏度很低(0-1%)。尽管结核杆菌培养具有更高的灵敏度(11-50%),但需要2-4周的培养时间。开胸胸膜活检为确定胸腔积液病因的“金标准”,在直视下可发现可疑病灶,并能选择性的进行活检,特异性和敏感性均高于其他任何检查方法,但此项检查创伤较大,手术风险较高。因此寻找敏感性和特异性更高的无创辅助诊断方法鉴别诊断结核性胸腔积液和恶性胸腔积液具有重要的临床意义。白细胞介素18(IL-18)和γ-干扰素(IFN-γ)是多效能的细胞因子,在Th1和Th2细胞免疫调节过程中均发挥着重要作用。最近研究发现IL-18和IFN-γ与结核性胸腔积液及恶性胸腔积液的发生、发展关系密切,本研究就联合检测结核性和恶性胸腔积液中病人胸水及血清标本和正常人血清标本中白细胞介素18和γ-干扰素浓度,分析比较IL-18和IFN-γ在结核性和恶性胸腔积液中的鉴别诊断价值及临床意义。二、材料与方法胸水及血清标本来自浙江大学医学院附属第一医院呼吸内科、杭州市红十字会医院结核病科及嵊州市人民医院呼吸内科2007年6月至2008年1月已经确诊的34例结核性胸腔积液患者和38例恶性胸腔积液患者,另外18例正常血清标本来自健康自愿者及正常献血员。胸腔积液患者于住院24小时内,未经过任何治疗前,经过患者同意,采用标准胸腔穿刺术抽取胸水后,留取10ml新鲜胸水及同时采取5ml静脉血2000r/min离心15分钟,收集上清液置于-20℃冰箱保存,待测定IL-18和IFN-γ。人白细胞介素-18(IL-18)测定采用双抗体夹心生物素化酶复合物-酶联免疫吸附试验(双抗体夹心ABC-ELISA法)。用抗人IL-18单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的IL-18与单抗结合,加入生物素化的抗人IL-18,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化酶标记物的抗生蛋白链菌素(Streptavidin)与生物素结合,加入酶底物邻苯二胺(OPD),出现黄色,加终止液硫酸,颜色变深,在492nm处测吸光度值(OD值),IL-18浓度与OD值成正比,可以通过绘制标准曲线求出标本中IL-18浓度。γ-干扰素(IFN-γ)测定采用双抗体夹心生物素化酶复合物-酶联免疫吸附试验(双抗体夹心ABC-ELISA法)。用抗人IFN-γ单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的IFN-γ与单抗结合,加入生物素化的抗人IFN-γ,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化酶标记物的抗生蛋白链菌素(Streptavidin)与生物素结合,加入酶底物邻苯二胺(OPD),出现黄色,加终止液硫酸,颜色变深,在492nm处测吸光度值(OD值),IFN-γ浓度与OD值成正比,可以通过绘制标准曲线求出标本中IFN-γ浓度。用SPSS11.5 for Windows统计软件包进行统计学分析处理,P＜0.05差异有统计学意义。三、结果正常人组血清IC-18的浓度为(152±58 ng/L),结核性胸腔积液患者组血清IC-18的浓度为(190±51ng/L),恶性胸腔积液组患者血清IC-18的浓度为(159±53 ng/L),结核性组血清IL-18的浓度高于正常人组血清IL-18的浓度及恶性胸腔积液组患者血清IL-18的浓度,但结核性组血清IL-18与正常人组血清IL-18比较差异无统计学意义(t值1.66,P＞0.05),结核性组血清IC-18与恶性胸腔积液组患者血清IL-18差异无统计学意义(t值1.8 3,P＞0.05),恶性胸腔积液组患者血清IL-18与正常人组血清IL-18比较差异无统计学意义(t值0.29,P＞0.05)。结核性胸腔积液患者组胸水IL-18的浓度为(1111±190 ng/L),恶性胸腔积液组患者胸水IL-18的浓度为(316±162ng/L),两组比较差异有统计学意义(t值14.1,P＜0.01)。正常人组血清IFN-γ的浓度为(42±26 ng/L),结核性胸腔积液患者组血清IFN-γ的浓度为(70±72ng/L),恶性胸腔积液组患者血清IFN-γ的浓度为(53±43ng/L)。结核性组血清IFN-γ的浓度高于正常人组血清IFN-γ的浓度及恶性胸腔积液组患者血清IFN-γ的浓度,但结核性组血清IFN-γ与正常人组血清IFN-γ比较差异无统计学意义(t值1.02,P＞0.05),结核性组血清IFN-γ与恶性胸腔积液组患者血清IFN-γ差异无统计学意义(t值0.92,P＞0.05),恶性胸腔积液组患者血清IFN-γ与正常人组血清IFN-γ比较差异无统计学意义(t值0.59,P＞0.05)。结核性胸腔积液患者组胸水IFN-γ的浓度为(1008±309ng/L),恶性胸腔积液组患者胸水(31±10ng/L)。两组比较差异有统计学意义(t值14.2,P＜0.01)。四、结论结核性、恶性胸腔积液及正常人三组血清IL-18和IFN-γ浓度差别无显著意义。而在结核性胸腔积液组胸水中IL-18和IFN-γ浓度要明显高于恶性胸腔积液组,两组比较差别有显著意义,胸水中IL-18和IFN-γ联合检测预测结核性胸腔积液的灵敏度、特异性、准确性分别为97.1%(33/34),94.7%(36/38),95.8%(69/72),诊断价值优于单个检测指标。对于鉴别诊断结核性和恶性胸腔积液有较大的临床价值。