【摘 要】
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几丁质合成酶(CHS)在昆虫表皮及其它合成几丁质的组织中发挥着重要的作用。在本研究中,通过RT-PCR和3’-RACE方法克隆得到了两种稻飞虱—褐飞虱及灰飞虱CHS的cDNA序列。通过
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几丁质合成酶(CHS)在昆虫表皮及其它合成几丁质的组织中发挥着重要的作用。在本研究中,通过RT-PCR和3’-RACE方法克隆得到了两种稻飞虱—褐飞虱及灰飞虱CHS的cDNA序列。通过系统进化树分析,两者都属于CHS1。据目前的报道,大部分昆虫都有两种类型的CHS(CHS1和CHS2),但通过褐飞虱基因组和转录组的研究分析和验证发现褐飞虱仅存在一个CHS—CHS1。不论是褐飞虱还是灰飞虱CHS1中都存在两个可变剪切,产生两个转录本(CHS1α和CHS1b),在褐飞虱中位于外显子19a和19b,而且通过对7种昆虫基因组结构的比较发现,除了蚜虫之外都含有两个可变剪切。褐飞虱可变外显子a在刚蜕皮的时候相对转录水平最高,外显子b通常在蜕皮前1-2天达到最高。通过显微注射的方法对褐飞虱进行RNAi实验,不论是沉默CHS1, CHS1a和CHS1b,都能下调其转录水平,并产生了随后的表型。沉默CHS1和CHS1a产生了畸形致死的表型,而沉默CHS1b虽然导致死亡率有所上升,但没有被观察到其它明显的表型。本论文的研究结果表明褐飞虱可能缺失了CHS2。今后进行RNAi介导的褐飞虱的防治,CHS1是重要的候选靶标基因之一
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