目的:本研究采用H₂O₂建立人脐静脉内皮细胞氧化损伤模型,探讨榅桲提取物对过氧化氢（H₂O₂）诱导人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）的氧化损伤和凋亡的保护作用及机制。方法:体外培养HUVEC,通过酶消化法对人脐静脉血管内皮细胞HUVEC进行消化传代,建立过氧化氢（H₂O₂）诱导的HUVEC细胞体外氧化损伤模型。采用Savage法脱蛋白,蒽酮-硫酸法对榅桲提取物进行分离纯化,含量测定,以不同浓度的榅桲提取物作用于HUVEC细胞,实验设正常对照组、H₂O₂氧化损伤模型组（10μmo L/L）、榅桲总黄酮（TFCOM）低浓度（10μg/mL）、中浓度（20μg/mL）、高浓度（40μg/mL）、榅桲多糖（PCOM）低浓度（15μg/mL）、榅桲多糖中浓度（30μg/mL）、榅桲多糖高浓度（60μg/mL）预处理24h后加H₂O₂损伤4h。在建立H₂O₂氧化损伤模型的基础上,通过形态学观察和MTT法测定HUVEC细胞的存活率的影响,进一步确定榅桲提取物对H₂O₂所致的血管内皮细胞氧化损伤的保护效果。AnnexinV-FITC/7-AAD双染流式细胞仪检测榅桲提取物对HUVEC细胞周期变化和细胞凋亡情况的影响,通过Hochest33258荧光染色法检测榅桲提取物防止HUVEC细胞遭受H₂O₂损伤在细胞形态上的变化特征;DCFH-DA活性检测试剂盒来检测细胞内活性氧（ROS）的表达水平,试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶（SOD）的活力,丙二醛（MDA）的含量,乳酸脱氢酶（LDH）的漏出量,Real-Time PCR检测Bax,Bcl-2,caspase-3 mRNA的表达,蛋白印迹（Western Blot）法检测Bax,Bcl-2,caspase-3蛋白的表达。观察榅桲提取物对H₂O₂诱导HUVEC细胞氧化损伤的影响。结果:与正常对照组比较,经10μmo L/L H₂O₂刺激后细胞活性明显降低,H₂O₂可引起G0/G1期细胞比例增高,S期细胞比例下降,血管内皮细胞凋亡率明显增加（P<0.05）,细胞内SOD活性降低、MDA含量升高、LDH漏出量增加（P<0.05）、细胞内抗凋亡的Bcl-2基因mRNA水平下降,促凋亡的Bax和caspase-3基因mRNA水平上升;加入不同浓度的TFCOM和PCOM干预后可对抗H₂O₂引起的这种变化。与模型组相比,榅桲提取物各处理组细胞存活率明显增加（P<0.05）,G0/G1期细胞比例均有所下降,S期细胞和G2/M期细胞比例有不同程度增加,细胞凋亡率明显降低SOD活力明显增强,MDA的含量和LDH的漏出量明显降低（P<0.05）,Bcl-2基因mRNA表达水平升高,而Bax,caspase-3基因mRNA表达水平降低（P<0.05）,与Western blot方法检测蛋白含量的结果一致。结论:榅桲提取物抑制H₂O₂诱导血管内皮细胞凋亡,减轻H₂O₂对内皮细胞的损伤作用,对H₂O₂诱导的血管内皮细胞损伤具有一定保护作用。