目的：　　肿瘤的免疫逃逸是肿瘤得以发生、发展的关键因素，其中肿瘤诱导大量的免疫抑制分子有效的抑制了免疫系统对肿瘤细胞的杀伤效应。本课题将研究奥沙利铂诱导宫颈癌U-14细胞CRT膜外翻，引起肿瘤细胞免疫原性死亡；探究MEK抑制剂PD-0325901通过抑制MAPK信号通路降低肿瘤微环境PD-L1的表达，并增强化疗药物抗肿瘤免疫活性，为宫颈癌免疫治疗提供新的思路和方法。　　方法：　　(1) 采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测奥沙利铂或MEK抑制剂PD-0325901单药和联合用药抑制宫颈癌U-14细胞增殖活性；　　(2)通过流式细胞仪(flow cytometry, FCM) 分析肿瘤细胞免疫原性；　　(3)淋巴细胞增殖实验分析肿瘤细胞免疫原性刺激活性；　　(4)肿瘤免疫联合治疗宫颈癌荷瘤小鼠的研究：构建U-14细胞荷瘤小鼠模型，对接种了宫颈癌细胞的40只Babl/C小鼠进行一般生长情况的观察。待右前腋下肿瘤直径长至5 mm后，将小鼠随机分成4组，每组10只：Ⅰ：模型组、Ⅱ：PD-0325901组、Ⅲ：奥沙利铂组、Ⅳ：PD-0325901+奥沙利铂联合组，观察小鼠一般生长情况和体重变化、计算瘤体积绘制肿瘤的生长曲线，待治疗结束后剖离瘤体，称取瘤重并计算每组抑瘤率。　　1）待治疗结束后处死小鼠，取瘤组织进行甲醛固定、脱水及石蜡包埋切片，对肿瘤组织进行免疫组织化学法检测肿瘤组织微血管CD34表达情况。　　2）利用Western blot检测各组瘤组织相关凋亡蛋白Bcl-2、Bax和CDK6的表达情况。　　3）通过免疫荧光法检测药物调控肿瘤细胞中CRT、PD-L1表达以及诱导肿瘤组织中免疫细胞浸润情况。　　结果：　　（1）体外实验结果显示：奥沙利铂或PD-0325901单药均能抑制宫颈癌细胞的增殖；随着药物联合浓度的增加，细胞被抑制的作用越明显，当奥沙利铂浓度为5μmol/L联合PD-0325901浓度为0.01 nmol/L时，抑制效率已达55.90%，表明MEK抑制剂联合奥沙利铂具有协同抑制作用。　　（2）体内结果显示：　　1）各组抑瘤率分别为：Ⅰ组：（---）；Ⅱ组：（37.0%）；Ⅲ组：（27.7%）；Ⅳ组：（64.1%）；观察到小鼠皮下移植瘤为圆形或不规则的结节状包块且活动度差。　　2）免疫组化结果显示，所有呈阳性反应的细胞均呈棕黄色， CD34主要表达在癌细胞的血管周围，联合用药组CD34表达的平均光密度值明显弱于其余三组，差异有统计学意义。　　3）Western Blotting 检测显示，相比于其余三组，联合用药组Bcl-2和CDK6的蛋白表达量明显降低，Bax蛋白表达量明显增高，P均<0.05，差异有统计学意义。　　4）免疫荧光检测显示，联合用药组CRT表达量高于其余三组，PD-L1表达量明显低于其余三组，并且联合用药组中CD8+T细胞浸润明显多于其余三组，而巨噬细胞表达明显低于其余三组，差异有统计学意义。　　结论：　　通过PD-0325901联合奥沙利铂能可以诱导CRT膜外翻，促进巨噬细胞识别和吞噬肿瘤细胞并引起肿瘤细胞免疫原性死亡；并通过联合用药阻断Ras/Raf/MAPK/ERK信号通路靶向抑制肿瘤微环境PD-L1的表达，并解除肿瘤微环境免疫耐受状态，继而促进细胞毒性T细胞（cytotoxic lymphocyte,CTL）增殖与杀伤活性，增强化疗药物抗肿瘤免疫活性，从而达到治疗宫颈癌的目的。