【摘 要】
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CD3分子是T细胞膜上的重要分化抗原（cluster of differentiation,CD）,和T细胞受体（TCR）构成CD3-TCR复合体,其对免疫信号传导及抗原识别有十分重要的作用。CD3ε是CD3复合体的重要组成部分,CD3ε与抗体的结合会对T细胞产生显著的生物学效应,因此成为优质的抗体药物靶标。CD3ε的抗体可作为Ⅰ型糖尿病、器官移植排斥等自身免疫性疾病的药物。此外,CD3ε双特异性
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81603019）；
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CD3分子是T细胞膜上的重要分化抗原（cluster of differentiation,CD）,和T细胞受体（TCR）构成CD3-TCR复合体,其对免疫信号传导及抗原识别有十分重要的作用。CD3ε是CD3复合体的重要组成部分,CD3ε与抗体的结合会对T细胞产生显著的生物学效应,因此成为优质的抗体药物靶标。CD3ε的抗体可作为Ⅰ型糖尿病、器官移植排斥等自身免疫性疾病的药物。此外,CD3ε双特异性抗体还可被用于肿瘤免疫治疗,它通过募集T淋巴细胞对抗肿瘤细胞而发挥作用。然而常规的抗CD3ε抗体尤其是单链抗体作为研究工具存在分子量较大、稳定性较弱、不易获得、制备成本高等缺点。因此,本研究提出用具有分子量小、稳定性高、溶解性高、及生产成本低等特性的抗CD3ε纳米抗体作为自身免疫疾病及肿瘤免疫治疗的新型潜在药物。本研究通过表达CD3ε蛋白的胞外端作为抗原,免疫骆驼并建立纳米抗体噬菌体文库。利用噬菌体展示技术筛选并通过常规ELISA实验鉴定,获得2株可识别目标抗原CD3ε的纳米抗体（CD3ε-Nb1、CD3ε-Nb57）。利用Western Blot方法鉴定了这2株纳米抗体对目标抗原CD3ε识别具有特异性。通过免疫荧光实验鉴定了抗CD3ε-Nb57纳米抗体可识别内源性CD3ε,初步鉴定了其对内源性抗原识别的特异性。本研究筛选获得的抗CD3ε纳米抗体及相关研究工作,为进一步研究抗CD3ε纳米抗体的生物学功能及开发基于抗CD3ε纳米抗体的生物医学应用奠定了实验基础。
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