微嫁接影响番茄砧木和接穗间茉莉酸及其相关基因不对称响应的探究

来源 :黑龙江八一农垦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wrx5428167
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嫁接,是一种古老且在生产上应用广泛的园艺技术,其有助于提高作物对生物和非生物胁迫的耐受力,保持优良性状。在嫁接过程中,植株最先表现出因切断而产生的损伤反应,伴随着糖响应基因在切口上下方的不对称表达,随后是连续的伤口愈合过程,同时切口处的基因不对称表达减弱。砧木和接穗中的基因表达一致是嫁接亲和的基础。茉莉酸(Jasmonic acid,JA)作为植物受到外界损伤时最先响应的应激激素,其对损伤的响应是否也存在这种不对称表达机制还尚未明确。为探究此问题,我们以番茄为研究对象,利用下胚轴微嫁接、超高效液相色谱串联质谱法以及q PCR等方法,分析了试验组(微嫁接苗)和对照组(切断未嫁接苗)在微嫁接早期(12 h内)时JA及其活性产物茉莉酸异亮氨酸(JA-Ile)含量的动态变化以及30个与JA相关基因转录水平的动态变化,研究结果如下:首先,微嫁接前JA与JA-Ile的含量在切口上下存在明显差异,但微嫁接后含量均趋于一致。嫁接组JA-Ile含量在2 h开始恢复,6 h恢复到正常水平,而对照组12 h仍未恢复。其次,我们发现微嫁接影响了11个基因的表达模式,其中有5个基因在切口上下的相对表达从不相关变为显著相关,分别为JA合成基因SlLOX11和SlAOS,JA信号传导基因SlCOI1以及JA相关防御基因SlJA2L和SlLAPA;5个基因由显著相关转为极显著相关,分别为JA信号传导基因SlJAZ1,JA信号调控基因Solyc01g090560 SlERF、Solyc06g075510SlERF、Solyc02g070040 SlERF和SlHD-Zip;而Solyc01g090320 SlERF的表达模式则由显著相关变为不相关。最后,我们比较了30个JA相关基因12 h内在番茄砧木和接穗中峰值的表达水平,发现微嫁接处理后大部分基因的峰值表达水平在砧木中较高,且砧木和接穗中的基因表达在微嫁接2 h后被诱导上调,但随着时间推移,12 h时接穗中的基因表达受到抑制,较对照有显著下调,而砧木中仍然保持上调状态。此外,我们还发现损伤中MYC2通过JA2L介导TD构成的级联响应的模式在嫁接后的砧木和接穗中都有明显的变化。综上所述,微嫁接后的伤口愈合可缓解12 h内番茄砧木和接穗中由损伤引起的JA与JA-Ile的不对称积累和JA-Ile降低趋势;此外,我们从30个基因中筛选了11个在微嫁接前后砧穗中表达模式有显著变化基因,说明微嫁接可以缓解番茄砧穗中因损伤引起的JA相关基因的不对称响应,且值得注意的是,微嫁接后12 h内JA相关基因在接穗中的变化较砧木更为显著;嫁接后SlMYC2-SlJA2L-SlTD级联效应在砧木中被加强,但在接穗中被显著降低。以上结果揭示了微嫁接对番茄中由损伤引起的JA响应及其对相关基因表达不对称机制的影响,同时筛选出了微嫁接前后表达模式显著变化的基因,为进一步找出植物体的嫁接亲和关键因子奠定了基础。
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