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东北林区是中国最大的天然林区,也是相关蜱虫传播疾病的主要自然疫源地之一。蜱虫作为一种专性吸血的体外寄生动物,可通过叮咬人畜散播多种病原体(病毒、螺旋体、立克次体等),严重威胁人类健康和畜牧业生产。近年来,世界范围内的蜱传疾病发病率升高,对公共卫生健康造成了较大影响。黑龙江省作为东北边境省份之一,具有复杂的地形地貌,森林资源充沛,适宜野生动物栖息,为蜱虫的存活和繁衍提供了良好的生境条件。此外,该省还设有多个边境口岸,与俄罗斯远东地区水路、公路、铁路相通,给蜱传疾病传入提供了条件。因此了解我国黑龙江省边境地区蜱传病原体感染情况,开展蜱类携带病原体的相关调查,掌握准确便捷的蜱传病原体检测方法,可为该地区制定相关蜱传传染病防控策略提供科学依据。本研究(1)借助2007-2017年全国报告的蜱传脑炎(Tick-borne encephalitis,TBE)病例数据对我国蜱传脑炎流行病学特征进行系统性分析;(2)建立基于重组酶介导的等温扩增技术(Recombinase aided amplification,RAA)的远东型蜱传脑炎病毒荧光RT-RAA快速检测方法;(3)在前两项研究的基础上对我国黑龙江边境地区(佳木斯市、伊春市、大兴安岭地区)采集的蜱虫标本开展蜱传脑炎病毒(Tick-borne encephalitis virus,TBEV)、发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)、鄂木斯克出血热病毒(Omsk Hemorrhagic Fever virus,OHFV)、兰格特病毒(Langat virus,LGTV)、波瓦生病毒(Powassan virus,POWV)、伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi sensulato,B.b.s.l)和斑点热群立克次体(Spotted Fever Group Rickettsia,SFGR)等7种病原体的分子筛查。研究结果显示:(1)2007-2017年全国共报告蜱传脑炎病例3165例,高发省份集中于东北地区,依次为内蒙古自治区、黑龙江省、吉林省,三省病例共占全国病例总数的98.4%,其中,呼伦贝尔市、延边朝鲜族自治州、牡丹江市、大兴安岭地区和伊春市为高发城市;蜱传脑炎病例多出现于春夏两季;患者有明显的职业特点,以农民、待业人员及家务工作者、工人为主,且自2014年以来,待业人员及家务工作者所占比例逐年上升,农民所占比例逐年下降;发病男女性别比为2.05:1,40-49岁年龄组是该病发病高峰人群。(2)建立的针对远东型蜱传脑炎病毒的荧光RT-RAA检测方法,特异性好,灵敏度较高,检测体外转录RNA标准品和病毒培养上清RNA的95%检测限分别为20copies/reaction和3pfu/reaction。(3)黑龙江省大兴安岭地区、伊春市、佳木斯市采集的2530只蜱虫标本中,TBEV、OHFV、SFTSV、LGTV、POWV全部为阴性;佳木斯地区的1185只蜱虫标本中,伯氏疏螺旋体阳性标本21份,阳性率为8.9%,斑点热群立克次体阳性标本141份,阳性率为59.5%;全沟硬蜱标本中B.b.s.l和SFGR的阳性率均高于森林革蜱;B.b.l.s 阳性标本分属于B.garinii和B.afzelii两种基因型,SFGR阳性标本分属于Candidatus R.tarasevichiae、R.heilongjiangensis和R.raoultii三种基因型。综上所述,黑龙江省为我国蜱传脑炎发病率最高的省份之一,其边境城市佳木斯市、伊春市、大兴安岭地区的蜱虫中TBEV、SFTSV、OHFV、LGTV、POWV的携带率均较低,结合我国目前尚未有感染OHFV、LGTV、POWV的病例报道,考虑这三种病毒尚未传入该地区。同时,佳木斯市蜱虫主要携带斑点热群立克次体和伯氏疏螺旋体,表明该地区发生斑点热和莱姆病的风险相对较高。本研究所建立的实时荧光RT-RAATBEV检测法为蜱传脑炎病毒快速检测提供了新的方法,为我国等温检测蜱传脑炎病毒做了方法上的补充,为现场及医疗条件落后地区蜱传脑炎病毒的筛查提供了技术支持。同时,蜱虫携带病原体筛查工作所得出的基础数据,对黑龙江省边境地区蜱媒疾病的预防和控制有一定的参考价值。