[目的]探讨血清甲胎蛋白(AFP)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、恶性肿瘤特异性生长因子(TSGF)及白细胞介素8(IL-8)联合检测在乙肝相关性原发性肝癌早期诊断及肝移植术预后判断中的临床价值。[方法]研究分为两部分：第一部分,血清AFP、AFU、TSGF及IL-8对乙肝相关性原发性肝癌早期诊断的价值：实验前期检索四种标记物相关文献,分别熟悉它们在肝癌诊断中的研究现状,构建联合检测的设计思路。①天津市第一中心医院器官移植中心2011年11月到2013年6月间行肝移植术患者250例,根据术前检查及初步诊断结果,将所有行肝移植术的乙肝肝癌、乙肝肝硬化患者选择入组,并根据术后病理诊断结果,最终筛选出确诊为乙肝肝癌患者30例,乙肝肝硬化患者30例,正常对照组选取活体肝移植供者30例。肝癌患者术前均未接受任何化疗或射频消融等治疗。②建立乙肝肝癌组、乙肝肝硬化组、正常对照组,分别检测术前AFP、AFU及白蛋白水平,血清AFP、AFU、TSGF及IL-8浓度,通过术后病理学确定它们的临床病理特征。对于乙肝肝癌组患者确定肿瘤分化、肿瘤直径、肿瘤数目、MELD评分、是否符合Milan标准及肿瘤分期等。③分别比较乙肝肝癌组、乙肝肝硬化组及正常组之间血清AFP、AFU白蛋白浓度；分别比较乙肝肝癌组、乙肝肝硬化组及正常组之间血清AFP、AFU、TSGFIL-8浓度；分析四种标记物及AFP、AFU白蛋白间的相关关系；比较分析血清AFP、AFU、TSGF及IL-8与临床病理特征间的关系,包括肿瘤分化、直径、数目等；建立四种标记物的受试者工作特性曲线ROC,并且确认理想cutoff值。在理想cutoff值下,分别确认并比较四种标记物对肿瘤诊断的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值。将四种标记物单独检测与联合检测时的敏感度、特异度、准确度等进行比较。第二部分,研究血清AFP、AFU、TSGF及IL-8对乙肝相关性原发性肝癌预后判断的价值：①对乙肝相关性原发性肝癌患者组进行研究,术前检测血清AFP、AFU、TSG、IL-8浓度,术后第1天、第7天、第14天及第28天继续对四种标记物进行监测②将患者根据术前血清AFP、AFU TSGF、IL-8浓度进行分组。建立AFP>500ng/ml组及AFP≤500ng/ml组;AFU＞700nmol/ml/hr组及AFU≤700nmol/ml/hr组；TSGF>75pg/ml组及TSGF≤75pg/ml组;IL-8>140pg/ml组及IL-8≤140pg/ml组。根据长期随访的结果,确认患者预后情况,建立患者预后与术前术后血清标记物水平之间的关系。③根据随访的预后情况,将患者分为复发组和无复发组,分别比较它们术后第1天、第7天、第14天及第28天的四种血清标记物浓度,找出它们与预后间的关系。④所有数据均采用SPSS19.0进行分析。数据采用均数±标准差表示。统计之前对异常分布数据进行对数转换。各组间的比较采用one-way ANOVA和独立样本t检验；变量间的关系采用Pearson相关系数分析；应用Kaplan-Meier法绘制术后累计生存率及复发率曲线,Log-Rank检验进行曲线的比较。[结果]第一部分：1.肝功能：乙肝肝癌组、乙肝肝硬化组及正常组之间,术前血清AST、ALT、ALB水平存在明显统计学差异(p<0.001),乙肝肝硬化组患者AST浓度最高,正常组患者AST浓度最低。2.标记物水平：乙肝肝癌组、乙肝肝硬化组及正常组之间,术前血清AFP、AFP、TSGF、IL-8水平存在明显统计学差异(p<0.001)。其中乙肝肝癌组血清AFP、AFU、TSGF的浓度在三组中为最高,乙肝肝硬化组和正常组AFP、AFU、TSGF的浓度水平相当。对于血清IL-8,乙肝肝硬化组浓度最高,正常组浓度最低,乙肝肝癌组浓度居中。3.标记物与肝功能之间的关系：对AFP、AFU、TSGF、IL-8与AST、ALT、ALB间的关系进行分析,只有AFP与AFU间存在相关关系(r=0.383,p<0.05)。余项均未发现明显相关关系。4.四种标记物与年龄、性别、MELD评分及肿瘤分期均未见明显相关性。血清AFP、AFU浓度与肿瘤分化、肿瘤大小及Milan标准均存在显著的相关性。肿瘤低分化患者血清AFP浓度显著高于中分化及高分化患者(p=0.007),而中分化和高分化患者间无明显差异。对于血清AFU浓度,肿瘤低分化患者显著高于肿瘤高、中分化者(p=0.004),高分化及中分化患者间无明显统计学差异。肿瘤直径>5cm的患者血清AFP浓度显著高于肿瘤直径≤5cm患者(p=0.032)。相反,对于肿瘤直径>5cm患者血清AFU浓度显著低于肿瘤直径≤5cm患者(p=0.043)。符合Milan标准患者血清AFP浓度显著低于超过Milan标准患者(p=0.009)：而符合Milan标准的患者血清AFU浓度却显著高于超过Milan标准患者(p=0.034)。此外,血清AFU浓度与肿瘤数目之间存在相关性。肿瘤数目≤3个的患者血清AFU浓度显著高于肿瘤个数>3个的患者(p=0.007)。其他项目间均未见明显相关性。5.理想cutoff值的确定：四种标记物理想cutoff值的确认是通过分别计算约登指数(约登指数=敏感度+特异度-1),并进行比较,取约登指数最大组的标记物浓度为理想cutoff值,此时该标记物对诊断具有较好的特异度及敏感度。确认的四种标记物理想cutoff值分别为AFP48.145ng/ml、AFU309.21nmol/ml/hr、TSGF54.475pg/ml、IL-8128.485pg/ml。6.单独检测和联合检测4种标记物对诊断原发性肝癌的敏感度、特异度及准确度：确定在理想Cut-off值下,AFP、AFU、TSG、IL-8对原发性肝癌诊断的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值。血清AFP对原发性肝癌的诊断具有较高的特异度(91.7%),较低的敏感度(66.7%)以及一定准确度(86.7%),阳性预测值及阴性预测值分别为82.1%、88.7%。将其与血清AFU、TSGF、IL-8进行比较,血清AFP特异度最高(91.7%),血清AFU的敏感度最高(90%),诊断准确度方面AFP及AFU相当(均为86.7%)。此外,血清AFP及AFU分别具有最高的阳性预测值(82.1%)及阴性预测值(94.4%)。将4种标记物联合检测可使诊断的敏感度提高到100%,特异度提高到100%,准确度提高到98.9%。对AFU与AFP进行联合检测,可使诊断敏感度从单独血清AFP检测时的66.7%提高到93.3%。再加上TSGF,则可达到95.3%。最终将对4种标记物进行联合检测则使敏感度达到100%。第二部分：1.乙肝肝癌组患者预后情况：30例乙肝肝癌组患者术后4个月、8个月、12个月的总体生存率分别为100%、95%、88%。术后4个月、8个月、12个月的肿瘤复发率分别为3%、22%、28%。2.术前不同标记物浓度水平与预后的关系：(1)AFP>700ng/ml组患者(n=7)术后4个月、8个月及12个月的生存率分别为100%、83%、56%；而AFP≤700ng/ml组患者(n=23)术后4个月、8个月及12个月的生存率均为100%,两组间存在明显统计学差异(p=0.016)。AFP>700ng/ml组患者术后4个月、8个月及12个月的肿瘤复发率分别为0%、56%、100%; AFP≤700ng/ml组患者术后4个月、8个月及12个月的肿瘤复发率均为4%,两组间存在明显统计学差异(p<0.001)。(2)血清AFU浓度＞700nmol/ml/hr组患者(n=5)术后4个月、8个月、12个月的生存率分别为100%、67%、67%；血清AFU浓度≤700nmol/ml/hr组患者(n=25)术后4个月、8个月及12个月的术后生存率分别为100%、100%、92%,两组生存率存在明显统计学差异(p=0.014)。血清AFU浓度＞700nmol/ml/hr组患者术后4个月、8个月、12个月的肿瘤复发率分别为20%、73%、100%；AFU≤700nmol/ml/hr组患者术后4个月、8个月及12个月肿瘤复发率分别为0%、5%、24%,两组间术后肿瘤复发率存在明显统计学差异(p<0.001)。(3)血清TSGF浓度>75pg/ml组患者(n=13)术后4个月、8个月、12个月生存率均为100%；而血清TSGF浓度≤75pg/ml组患者(n=17)术后4个月、8个月、12个月的生存率分别为100%、92%、76%,两组生存率未见明显统计学差异(p=0.169)。TSGF>75pg/ml组术后4个月、8个月及12个月的肿瘤复发率分别为8%、18%、28%；TSGF≤75pg/ml组术后4个月、8个月及12个月肿瘤复发率分别为0%、17%、17%,两组复发率间未见明显统计学差异(p=0.382)。(4)血清IL-8浓度>140pg/ml组患者(n=17)术后4个月、8个月及12个月的生存率分别为100%、88%、88%；血清IL-8浓度≤140pg/m1组患者(n=13)术后4个月、8个月及12个月生存率分别为100%、100%、90%,两组生存率间未见明显统计学差异(p=0.546)。血清IL-8>140pg/m1组术后4个月、8个月及12个月肿瘤复发率分别为8%、35%、52%；而血清IL-8≤140pg/ml组术后4个月、8个月及12个月肿瘤复发率分别为0%、7%、26%,两组复发率间存在明显统计学差异(p=0.034)。3.复发组与无复发组术后血清标记物浓度的比较：(1)复发组(n=6)与无复发组(n=24)患者术后第1天血清AFP浓度无明显统计学差异(p=0.225)。术后第7天两组患者血清AFP浓度无明显统计学差异(p=0.219)。两组患者术后第14天血清AFP浓度无明显统计学差异(p=0.521)。两组患者术后第28天血清AFP浓度存在明显统计学差异(p=0.043),即复发组患者术后第28天血清AFP浓度高于无复发组患者。(2)复发组与无复发组患者术后第1天血清AFU浓度未见明显统计学差异(p=0.120)。术后第7天两组患者血清AFU浓度未见明显统计学差异(p=0.169)。术后第14天两组患者血清AFU浓度未见明显统计学差异(p=0.492)。术后第28天两组患者血清AFU浓度存在明显统计学差异(p=0.040),即复发组患者术后第28天血清AFU浓度高于无复发组患者。(3)复发组与无复发组患者术后第1天血清TSGF浓度未见明显统计学差异(p=0.247)。两组患者术后第7天血清TSGF浓度未见明显统计学差异(p=0.532)。两组患者术后第14天血清TSGF浓度未见明显统计学差异(p=0.071)。两组患者术后第28天血清TSGF浓度未见明显统计学差异(p=0.151)。(4)复发组与无复发组患者术后第1天血清IL-8浓度未见明显统计学差异(p=0.516)。两组患者术后第7天血清IL-8浓度未见明显统计学差异(p=0.187)。两组患者术后第14天血清IL-8浓度未见明显统计学差异(p=0.551)。两组患者术后第28天血清IL-8浓度存在明显统计学差异(p=0.045),即复发组患者术后第28天血清IL-8浓度高于无复发组患者。[结论]1.对于长期慢性乙肝感染、有发生原发性肝癌可能的高危患者,在对血清AFP检测的基础上同时进行AFU、TSGF、IL-8的联合检测,可显著提高原发性肝癌诊断的敏感度、特异度和准确度。2.术前血清AFP、TSGF、IL-8浓度水平对患者预后具有一定的预测价值。3.术后连续监测血清AFP、TSGF、IL-8浓度变化,对患者肝癌复发具有一定的预测价值。