拟南芥生长素相关基因G46的图位克隆及功能研究

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生长素是一类重要的植物激素,在植物生长和发育的过程中起着非常重要的作用。生长素的作用机理主要分为生长素生物合成、极性运输和信号传导三个方面。利用生物化学和分子遗传学方法对其作用机理进行研究,取得了很大进展。但是生长素如何调控植物生长发育还不清楚。我们以拟南芥npy5pid双突变体为背景材料进行EMS诱变,试图分离生长素通路中的未知基因,并揭示其功能。我们筛选到一个在npy5pid双突变体背景下完全产生针状花序的突变体g46,通过图位克隆的方法,分离得到G46基因,发现其编码细胞色素P450(Cytochrome P450)超家族成员CYP79F1。g46单突变体具有多重突变效应,叶片弯曲、维管束发育迟缓、多分枝、育性差,但其胚胎发育正常。基于生长素在叶片形态和顶端优势中的重要作用,我们推测g46突变体中生长素含量或信号转导发生了改变。为了验证这一点,我们将生长素响应基因DR5:GUS导入g46突变体。结果发现,在g46单突变体子叶中DR5:GUS的响应明显增强。在pid突变体背景下失活G46/CYP79F1基因,可使pid表型增强,产生完全针状花序,且花序轴明显缩短,而pid和g46单突变体并没有这样的表型。以上结果说明PID和G46/CYP79F1之间存在遗传相互作用,共同调控花序的生长发育。在g46单突变体中,生长素极性运输转运蛋白PIN1的极性定位和表达都没有明显的变化,说明突变体中生长素的极性运输可能未受影响。G46/CYP79F1可能通过调控生长素合成、信号转导控制拟南芥的生长发育。
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