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第一部分乌斯他丁与环磷酰胺对乳腺癌细胞MCF-7及MDA-MB-231 MMP-9的表达及增殖侵袭的影响目的:探讨乌斯他丁与环磷酰胺对乳腺癌细胞MCF-7及MDA-MB-231 MMP-9的表达及增殖侵袭的影响方法:体外培养的乳腺癌细胞MCF-7/ MDA-MB-231随机分为八组:空白对照组,乌斯他丁高、中及低剂量组,环磷酰胺组,乌斯他丁高、中及低剂量组+环磷酰胺组,采用细胞计数法及噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测UTI和CTX对两种乳腺癌细胞MMP-9表达的影响;通过Boyden小室侵袭实验检测该两种细胞的浸润能力[1]。结果:UTI抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖,与对照组细胞相比,细胞数目明显减低,细胞增殖下降;能使两细胞中MMP-9基因表达下降,细胞的增殖侵袭能力降低,通过与CTX组比较,其抑制作用不如CTX,但CTX与UTI联合,其作用优于CTX,且UTI联合CTX组的细胞增殖侵袭能力明显减弱。结论:UTI能增强CTX诱导的乳腺癌细胞MCF-7/ MDA-MB-231增殖抑制作用,且两者具有协同效应。其机制可能UTI与降低MMP-9基因的表达等有关。第二部分乌斯他丁和环磷酰胺对MCF-7乳腺癌裸鼠中MMP-9表达和抑制作用目的:研究乌斯他丁(UTI)和环磷酰胺(CTX)对MCF-7乳腺癌裸鼠中MMP-9的表达和抑制作用。方法:选用尿胰蛋白酶抑制剂乌斯他丁(UTI),乳腺癌裸鼠模型;雌性裸鼠40只,接种人乳腺癌细胞MCF-7,分成生理盐水组(对照组)、CTX组、UTI 2.5万单位组、UTI 5万单位组、UTI 10万单位组、CTX+ UTI 2.5万单位组、CTX+UTI 5万单位组及CTX+ UTI 10万单位组,每组5只,接种后7天,开始腹腔给药,接种14天后处死所有裸鼠,统计皮下平均瘤重,使用免疫组织化学方法分析MMP-9表达,用RT-PCR方法检测UTI和CTX对乳腺癌中MMP-9表达的影响。结果:皮下瘤重分别为(7.58±0.57、1.21±0.11*、3.78±0.42*、3.01±0.38*、1.97±0.13*、0.83±0.11*、0.72±0.11*和0.43±0.063*)g,(*与对照组比较P<0.05),MMP-9蛋白表达,UTI与CTX组和对照组比较下降(P<0.05),UTI+CTX组与CTX组比较:蛋白表达下降(P<0.05),而UTI与CTX组和对照组比较,MMP-9基因表达下降(P<0.05), UTI+CTX组与CTX组比较,MMP-9基因表达也下降(P<0.05)。结论:UTI与CTX均能抑制乳腺癌的增殖,且两者具有协同作用,其机制可能与UTI降低MMP-9基因、蛋白表达有关。