DNA复制是指DNA双链在细胞分裂间期进行的以一个亲代DNA分子为模板,合成两条子代DNA链的过程。在真核细胞中,DNA解旋酶复合体(Cdc45–Mcm–GINS helicase complex,简称CMG)在DNA复制过程中是形成和维持复制叉主要复合体,Cdc45做为CMG的重要组成分子之一,在调控DNA复制过程中扮演着重要的角色。泛素化指泛素分子在一系列酶的作用下,共价结合到靶蛋白上的过程,参与了真核生物几乎所有生命活动的调控。目前已有许多研究发现,在DNA复制及损伤修复过程中,多种相关蛋白受到泛素化修饰调控,以保障基因组的稳定。本研究中,我们以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)作为研究对象,探究Cdc45在DNA复制过程中是否存在泛素化修饰,并对其调控机制和在DNA复制中的作用进行初步研究。1)首先,我们通过外源诱导表达,确定了Cdc45的修饰性条带为泛素化条带,并通过点突变筛选出Cdc45上的泛素化位点K156和K643。2)然后,我们又通过细胞周期同步化处理和基因敲除等手段,证实Cdc45在复制期间会被泛素连接酶Dia2泛素化,泛素化的Cdc45又会被去泛素化酶Doa4去泛素化。3)最后,通过流式分析DNA合成,发现Cdc45的泛素化被抑制会导致DNA复制周期的延长,但去泛素化酶的敲降又能弥补这一缺陷。本研究发现在DNA复制期间Cdc45存在泛素化和去泛素化修饰调控,并初步证实这种泛素化调控模式的转变参与调控DNA复制,为重新认识Cdc45在DNA复制中的作用提供新依据。