目的：利用PMMA环研制新型羊膜接触镜，探讨其在不同程度兔角膜上皮损伤修复中的应用效果。 方法: 羊膜接触镜的制备方法及其在兔中央角膜上皮损伤修复中的应用PMMA环根据兔眼结膜囊的印模磨制。16只兔左眼均去除中央10mm角膜上皮，随机分为两组，实验组羊膜片用PMMA环和纤维蛋白胶固定：PMMA环包裹在羊膜中，塞入结膜囊后，折叠的羊膜之间及羊膜与PMMA环之间注入纤维蛋白胶以加固羊膜的支撑作用，但是纤维蛋白胶不用来粘附眼表的任何部位。对照组羊膜用10-0尼龙缝线间断缝合。术后裂隙灯显微镜观察7天，记录上皮愈合情况及并发症，计数每种并发症的兔只数，T-test比较两组之间的差异。羊膜接触镜联合角膜缘干细胞移植在兔角膜缘损伤修复中的应用制备兔角膜缘及角膜上皮损伤模型，培养角膜缘上皮细胞，消化收集后接种于Matrigel包被的培养皿中贴壁20分钟，收集贴壁的细胞(2X105个/眼)注射到羊膜接触镜与损伤的眼表之间(n=8)，并在体外检测细胞形成复层的能力。术后24小时后更换羊膜，如果荧光素呈弥漫性染色，则重复细胞注射，对照组不注射细胞，仅植入羊膜接触镜(n=8)，空白对照组损伤后不做处理，裂隙灯照相随访2周，计数角膜上皮合、角膜感染、新生血管、角膜上皮缺损的兔只数，单因素方差分析比较两两之间的差异。 结果: 羊膜接触镜的在兔中央角膜上皮损伤修复中的应用两组中的兔角膜上皮均在5天后愈合，两组间角膜上皮愈合时间、周边角膜新生血管均无显著性差别。在无缝线组，所有的羊膜在随访期间保持完整，1只兔结膜由于暴露于PMMA环而出现部分上皮缺损，在对照组，观察到50％以上的兔实验眼出现结膜水肿，缝线松脱，植片脱落，点状出血，和部分结膜上皮缺损(各种并发症的兔只数在两组间的差别P<0.05)。 羊膜接触镜联合角膜缘干细胞移植在兔角膜缘损伤修复中的应用免疫组化染色显示20分钟内贴壁的角膜缘细胞Ki67(+)，integrinα6(+)，integrinβ1(+)，P63(+)，少数细胞K3/K12阳性，且细胞可在气-液界面培养1周后形成复层结构，HE染色可见细胞排列模式接近正常角膜上皮组织，电镜下可见微绒毛、紧密连接等超微结构。20分钟后贴壁的细胞呈Cx43(+)，K3/K12阳性，细胞移植后第14天，实验组6/8只兔眼表上皮得以重建，羊膜组每只兔出现不同程度的结膜化表现或新生血管，1只兔角膜上皮愈合不良，空白对照组表现为3只兔感染、5只兔角膜上皮缺损，均表现为周边角膜新生血管、愈合不良，感染等。单因素方差分析结果显示A组和B损伤愈合均优于空白组(P<0.05)，A组新生血管少于B组和C组(P<0.05)，B组与C组之间新生血管没有差异，但是C组愈合不良、感染显著高于B组。免疫组化染色显示实验组角膜区域上皮K3/K12(+)、Occludin(+)、integrinα6(+)、MUC5AC(-)，表明是角膜上皮表型，而对照组角膜上皮MUC5AC(+)、K3/K12(-)，为结膜上皮表型。 结论: 羊膜接触镜在兔中央角膜上皮损伤修复中的应用利用PMMA环联合纤维蛋白胶在眼表固定羊膜的并发症远远少于传统的间断缝合法，这种羊膜接触镜固定技术可避免缝线所固有的并发症，减轻病人痛苦、大大节省手术时间，在修复中央角膜缺损时可以替代传统缝线固定技术。羊膜接触镜联合角膜缘干细胞移植在兔角膜缘损伤修复中的应用羊膜接触镜联合角膜缘干细胞移植可以用于角膜缘损伤后的上皮再生修复，这种基于单细胞的眼表重建技术可以避开角膜上皮组织重建、收集中的技术难题，并节省组织构建所需的时间，PMMA环-羊膜接触镜与组织工程技术的结合是我们进一步研究的方向。